ALBERT

Description / Table of Contents: Zusammenfassung Es wurden Versuche angestellt, um auxotrophe Mutanten vonPhytophthora infestans zu erhalten, inden man die Zoosporen entweder mit ultra-violettem Licht oder mit Methylsulfonsäure aethylester behandelte. Für die Schaffung von Einzelsporenkolonien von Zoosporen wurde ein Pektin-Glukose-Nährmedium verwendet. Der Prozentsatz an Zoosporen, die ihr Wachstum auf diesem Nährboden über das Stadium der Sporenbildung hinaus fortsetzten, änderte mit dem Isolat. Für den in diesen Versuchen verwendeten Klon betrug er ungefähr 15%. Behandlung mit ultraviolettem Licht während 20 sec verminderte den Prozentsatz der Anzahl Kolonien bildender Sporen nicht, obwohl die Wachstumsrate dieser Kolonien etwas geringer war als jene von unbehandelten Kulturen. UV-Bestrahlung während 40 sec setzte die Zahl der Kolonien bildenden Sporen um ungefähr 99% herab (0,1 bis 0,7% der ausgesäten Sporen bildeten Kolonien) und reduzierte auch deutlich die Wachstumsrate der überlebenden Kolonien. Sporen, die während 60 sec bestrahlt wurden, bildeten keine Kolonien. UV-Bestrahlung bis zu 60 sec hatte nur sehr geringen Einfluss auf die Keimfähigkeit der Sporen, und um die Keimung vollständig zu unterbinden, war eine Bestrahlungsdauer von etwa 4 min nötig. Behandlung mit Methylsulfonsäure aethylester hatte keinen nennenswerten Einfluss auf die Wachstumsrate der überlebenden Kolonien. Ungefähr 2.000.000 Sporen wurden mit ultraviolettem Licht und etwa 3000 Sporen mit Methylsulfonsäure aethylester behandelt. Gesamthaft wurden 545 überlebende Sporen der erstgenannten Behandlungsart und 155 überlebende Sporen der Behandlung mit Methylsulfonsäure aethylester isoliert und auf Mutation hinsichtlich Auxotrophie untersucht, indem bestimmt wurde, ob sie auf dem Minimal-Medium wuchsen. Alle überlebenden Sporen wuchsen möglicherweise auf dem Minimal-Medium, obwohl dies bei vielen Überlebenden der Behandlung mit ultravioletter Bestrahlung erst nach einer langen Verzögerung oder in einigen Fällen nach einer bis zu drei Monaten dauernden Wachstumsperiode auf Bohnen-Agar eintrat. Als Inokulum für diese Versuche wurden mit Myzelium infizierte Agar-Würfel (0,5 mm3) verwendet, die vom Rand der wachsenden Kulturen geschnitten wurden. Alle nicht wachsenden Isolate reagierten, wenn dem Minimal-Medium eine vollständige Mischung von Aminosäuren beigefügt wurde, sie wuchsen aber nicht, wenn der Nährboden mit einer grösseren Anzahl einzeln zugefügter Aminosäuren ergänzt wurde oder wenn Mischungen von Vitaminen oder Nukleinsäuren beigefügt wurden. Alle geprüften nichtwachsenden Sporen gediehen gut auf dem Minimal-Medium, wenn bei Beginn der Kultur ein Inokulum von ungefähr fünffacher Grösse verwendet wurde. Dieses Wachstum wird nicht auf die mit dem Inokulum zugeführten zusätzlichen Nährstoffe zurückgeführt, denn selbst nach wenigstens sechs Abimpfungen auf dem Minimal-Medium hielt das Wachstum in unvermindertem Masse an, vorausgesetzt dass jede Abimpfung mit einem grossen Inokulum begonnen wurde. Auf diese Weise würden die anfänglich übertragenen Wachstumsfaktoren am Ende des Versuches beträchtlich geschwächt und in einem viel geringeren Grad vorhanden sein als in einem kleinen Inokulum, das von Kulturen auf Bohnen-Agar stammt. Es wird daher angenommen, dass das Ausbleiben des Wachstums auf eine durch Behandlung mit dem Mutagen hervorgerufene, nicht genetisch bedingte Schwächung der Fähigkeit der Isolate, das Wachstum mit einem kleinen Inokulum anzuregen, zurückzuführen ist, und nicht auf eine Mutation zur Auxotrophie. Es wurden keine stabilen auxotrophen Mutanten isoliert, doch war die Zahl der untersuchten überlebenden Sporen zu klein, um irgendwelche Schlüsse ziehen zu können.