ISSN:
1432-1203
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Biology
,
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Zwei Seren des Phänotypus Ch1SS, die unter Standardtestbedingungen keine Pseudocholinesteraseaktivität aufwiesen, wurden mit Hilfe der Stärkegel-Elektrophorese, der Mikromanometrie und mit immunologischen Methoden näher untersucht. Nach elektrophoretischer Auftrennung läßt sich in diesen “silent gene”-Seren eine Pseudocholinesteraseaktivität nachweisen; im Vergleich zu der Aktivität von Normalserum erscheint diese sehr gering und läßt sich nur in der c4-Zone erkennen. Die Identifizierung gelingt mit Hilfe spezifischer Färbeverfahren unter Verwendung verschiedener Substrate und Inhibitoren. Die quantitative Bestimmung von Pseudocholinesteraseaktivität im “silent gene”-Serum mit mikromanometrischen Methoden ergab eine Aktivität von 2–3% gegenüber den Kontrollen (Benzoylcholin als Substrat). Durch Immunisierung von Kaninchen mit gereinigtem Pseudocholinesteraseprotein wurden Antiseren erhalten; zwischen “silent gene”-Serum und diesen Antiseren konnten Präzipitationsreaktionen im Immuno-Diffusionstest, in der Immuno-Elektrophorese und mit einer Immuno-Adsorptionsmethode nachgewiesen werden. Diese Ergebnisse lassen annehmen, daß bei den von uns untersuchten Fällen das “silent gene” im Pseudocholinesterasepolymorphismus eine Enzymproteinsynthese steuert; das nachgewiesene Pseudocholinesteraseprotein scheint sich qualitativ von dem Enzymprotein des Normalserums zu unterscheiden.
Notes:
Abstract Two sera “without” pseudocholinesterase activity corresponding to the homozygous phenotype Ch1SS are examined by electrophoretical, manometric, and immunological methods. These “silent gene” sera show no activity under the common conditions (spectrophotometric assay). After electrophoretical separation of “silent gene” serum an esterase activity is found which can be identified as pseudocholinesterase activity, although it is weak in comparison with the activity of usual sera. The pseudocholinesterase activity of “silent gene” serum can be demonstrated only in the zone “c4” where 90% of the total activity is present if usual serum is inserted. The identification has been achieved by staining procedures applying several substrates and inhibitors. Quantitative estimation of this pseudocholinesterase activity was carried out by micromanometric assays with benzoylcholine as substrate. The activity of “silent gene” sera was 2–3% of normal serum. Antisera against human pseudocholinesterase-protein have been obtained by immunization of rabbits with a highly purified enzyme protein. Between these antisera and the homozygous “silent gene” sera precipitates were found in immuno double-diffusion tests and immunoelectrophoresis. They could be identified as pseudocholinesterase protein by esterase staining under various conditions. Quantitative estimations have been carried out by immuno-adsorption assays comparing the amount of antibody fixed by usual serum and by “silent gene” serum. The results presented in this paper suggest that the “silent gene” in pseudocholinesterase polymorphism induces in these two cases the synthesis of an enzyme protein which is similar to the enzyme protein of usual pseudocholinesterase. The weak activity is due to a qualitative difference between “silent gene” enzyme protein and the normal pseudocholinesterase protein. A structural alteration of the enzyme protein is assumed to be more likely than a quantitative difference in protein synthesis.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00281049
Permalink