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  • 1
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    Springer
    Calcified tissue international 12 (1973), S. 281-294 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Glycosaminoglycans ; Odontoblasts ; Predentine ; Mineralization
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les glycosaminoglycanes (GAGs) de la couche prédentine-odontoblastes, isolée à partir de dents permanentes de porcs, formant de la dentine, ont été analysés. 1. La microscopie optique et électronique montrent que les odontoblastes et la prédentine sont présents en quantité à peu près équivalente. 2. Les hexosamines constituent 0.84 μg/mg de poids humide de tissu (2.9 μg/mg en poids sec). 3. Par électrophorèse à membrane d'acétate de cellulose, on obtient trois pics distincts avec les mobilités électrophorétiques de l'hyaluronate (HA), du sulfate de kératane (KS) et du sulfate de chondroitine (CS). 4. Cinq fractions contenant de l'hexosamine sont obtenues lorsque les GAGs sont séparés sur des microcolonnes de CPC cellulose. Ces fractions contiennent un CS surtout 4-sulfaté (30% du total), un CS surtout 6-sulfaté (16%) HA (14%), sulfate de dermatane (DS) 7% et une fraction contenant à la fois KS et des glycoprotéines (32%). 5. Les constituants en hexosamine des fractions CS et HA, séparés sur résine échangeuse d'ion Dowex 50 W-X8 ne présentent respectivement que de la galactosamine et de la glucosamine confirmant la composition en GAGs. 6. Le «rapport carbazole-orcinol» de la fraction DS est de 0.62. 7. KS, déterminé par chromatographie avec de l'ECTEOLA-cellulose et par précipitation de sulfite hydrogéné, constitue environ 4% de l'hexosamine total. 8. un «profil d'élution de chlorure de magnésium neutre» et «un profil d'élution de chlorure de magnésium acide» sont obtenus pour CS+DS.
    Abstract: Zusammenfassung Die Glykosaminoglykane (GAGs) der Odontoblasten-Prädentin-Schicht, welche von Dentin-bildenden bleibenden Schweinezähnen herausseziert wurden, wurden isoliert und analysiert und ergaben folgende Resultate: 1. Licht-und Elektronenmikroskopie deuteten darauf hin, daß Odontoblasten und Prädentin zu ungefähr gleichen Teilen vorhanden waren. 2. Der Gehalt an Gesamthoexosaminen des Gewebes betrug 0,84 μg/mg Naßgewicht (2,9 μg/mg Trokkengewicht). 3. Die Celluloseacetat-Membranelektrophorese zeigte drei deutliche Maxima zusammen mit dem elektrophoretischen Bewegungsvermögen von Hyaluronsäure (HA), Keratin-Schwefelsäure (KS) und Chondroitin-Schwefelsäure (CS). 4. Fünf Hexosamin-haltige Fraktionen erhielt man durch Auftrennen der GAGs mit CPC-Cellulose-Mikrokolonnen. Diese wurden als vorwiegend 4-sulfatiertes CS (30% der Gesamtmenge), vorwiegend 6-sulfatiertes CS (16%), HA (14%), Dermatinsulfat (DS, 7%) und eine Fraktion, welche beides, KS und Glykoproteine (32%) enthielt, identifiziert. 5. Die Hexosaminanteile der CS-und HA-Fraktionen, welche mit Dowex 50W-X8 Ionenaustauschharz getrennt wurden, zeigten nur die Anwesenheit von Galactosamin und Glucosamin, was die Beschaffenheit der GAGs unterstreicht. 6. Das Verhältnis “Carbazol-Orcinol” der DS-Funktion war 0,62. 7. KS, welche mit ECTEOLA-Cellulose-Chromatographie und Hydrogensulfit-Fällung gemessen wurde, machte etwa 4% der Gesamthoexosamine aus. 8. Für CS und DS wurde ein “neutrales Magnesiumchlorid-Elutionsprofil” und ein “saures Magnesiumchlorid-Elutionsprofil” aufgenommen.
    Notes: Abstract The glycosaminoglycans (GAGs) in the odontoblast-predentine layer, dissected out from dentinogenically active permanent porcine teeth, have been isolated and analyzed with the following results. 1. Light and electron microscopy indicated that odontoblasts and predentine were present in roughly equal amounts. 2. The total hexosamines accounted for 0.84 μg/mg tissue wet weight (2.9 μg/mg dry weight). 3. Cellulose acetate membrane electrophoresis gave three distinct peaks with the electrophoretic mobilities of hyaluronate (HA), keratin sulphate (KS) and chondroitin sulphate (CS). 4. Five hexosamine-containing fractions were obtained when the GAGs were separated on CPC cellulose microcolumns. These were identified as a predominantly 4-sulphated CS (30% of the total) a predominantly 6-sulphated CS (16%), HA (14%), dermatan sulphate (DS) 7%, and a fraction containing both KS and glycoproteins (32%). 5. The hexosamine constituents of the CS and HA fractions, separated on Dowex 50W-X8 ion exchange resin, showed only galactosamine and glucosamine respectively thus supporting the identities of the GAGs. 6. The “carbazole-orcinol ratio” of the DS fraction was 0.62. 7. KS, isolated by ECTEOLA-cellulose chromatography and by hydrogen sulphite precipitation, accounted for around 4% of the total hexosamine. 8. A “neutral magnesium chloride elution profile” and an “acid magnesium chloride elution profile” were obtained for the CS+DS.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 2
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    Springer
    Calcified tissue international 13 (1973), S. 271-285 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Glycosaminoglycans ; Extraction ; Epiphysis ; Cartilage ; Bone
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Des glycosaminoglycanes de zones au repos, sériées, hypertrophiques et calcifiées de la métaphyse épiphysaire et du cartilage du septum nasal ont été extraits à l'aide d'un solvant, 3 M GuCl, selon Sajdera et Hascall (1969), pour séparer les glycosaminoglycanes en une partie que l'on peut extraire et une partie qui reste liée au tissu. Le cartilage épiphysaire nécessite des temps d'extraction plus prolongés que le cartilage du septum nasal pour extraire des quantités similaires de glycosaminoglycanes acides suggérant une liaison plus étroite de ces derniers dans le tissu. Vers le front de calcification, les glycosaminoglycanes sont extraits plus facilement alors que dans la zone calcifiée pas plus de 30% ne peut être extrait. Des résultats obtenus par le procédé de microfractionnement CPC d'Antonopoulos et coll. (1964) indiquent une distribution similaire selon le poids moléculaire et/ou la densité de charge pour le chondroitine sulfate qui se laisse extraire ou non du cartilage du septum nasal et le chondroitine sulfate que l'on ne peut extraire du cartilage du septum nasal et des zones au repos et sériées de la métaphyse. Les glycosaminoglycanes des zones hypertrophiques et calcifiées que l'on ne peut extraire sont surtout de faible poids moléculaire et/ou leur densité de charge se compare au pool que l'on peut extraire. L'acide hyaluronique ne peut être extrait du septum nasal et des zones au repos, sériées et hypertrophiques avec des concentrations croissantes vers le front de calcification. Dans la zone calcifiée, un changement avec augmentation de l'acide hyaluronique que l'on peut extraire est noté. Ces résultats sont discutés.
    Abstract: Zusammenfassung Die sauren Glycosaminoglycane von ruhenden, säulenförmigen, hypertrophischen und verkalkten Zonen der Epiphysen-Wachstumsplatte und des Nasenseptum-Knorpels vom Kalb wurden mittels eines dissoziierenden Lösungsmittels, 3 M Guanidinchlorid, nach Sajdera und Hascall (1969) extrahiert, um die Glycosaminoglycane in einen extrahierbaren und einen unextrahierbaren Anteil — dieser bleibt ans Gewebe gebunden — zu trennen. Der Epiphysenknorpel beanspruchte längere Extraktionszeiten als der Nasenseptumknorpel, um vergleichbare Mengen saurer Glycosaminoglycane abzugeben. Dies deutet auf eine stärkere Bindung der Proteoglycane im Gewebe. Die Glycosaminoglycane ließen sich leichter aus dem Bereich der Verkalkungsfront extrahieren, während aus der verkalkten Zone nicht mehr als 30% extrahiert werden konnten. Die Resultate, die mit dem Cetylpyridinchlorid-Mikrofraktionierungsverfahren von Antonopouloset al. (1964) erhalten wurden, deuteten auf eine ähnliche Verteilung entsprechend dem Molekulargewicht und/oder der Ladungsdichte für extrahierbares und unextrahierbares Chondroitinsulfat im Nasenseptumknorpel und in ruhenden und säulenförmigen Zonen der Epiphysen-Wachstumsplatte. Die unextrahierbaren Glycosaminoglycane in hypertrophischen und verkalkten Zonen zeigten vorwiegend niederes Molekulargewicht und/oder niedere Ladungsdichte im Vergleich zum extrahierbaren Anteil. Die Hyaluronsäure ließ sich aus Nasenseptum und ruhenden, säulenförmigen und hypertrophischen Zonen nicht extrahieren und zeigte höhere Konzentrationen als in der Verkalkungsfront. In der verkalkten Zone erfolgte eine Verschiebung zu meist extrahierbarer Hyaluronsäure. Die Bedeutung dieser Befunde wird diskutiert.
    Notes: Abstract The acid glycosaminoglycans of resting, columnar, hypertrophic and calcified zones of calf epiphyseal growth plate and of nasal septum cartilage were extracted with a dissociative solvent, 3M GuCl, according to Sajdera and Hascall (1969), to separate the glycosaminoglycans into an extractable pool and an unextractable pool which remains bound within the tissue. Epiphyseal cartilage required longer extraction times than did nasal septum cartilage to extract comparable amounts of acid glycosaminoglycans suggesting a stronger binding of proteoglycans within the tissue. Towards the calcification front the glycosaminoglycans were extracted more easily while in calcified zone not more than 30% could be extracted. Data obtained by the CPC microfractionation procedure of Antonopouloset al. (1964) indicated similar distribution according to molecular weight and/or charge density for extractable and unextractable chondroitin sulphate in nasal septum cartilage and in resting and columnar zones of epiphyseal growth plate. Unextractable glycosaminoglycans in hypertrophic and calcified zones were of predominantly low molecular weight and/or charge density compared to the extractable pool. Hyaluronic acid was unextractable in nasal septum and in resting, columnar and hypertrophic zones with increasing concentrations towards the calcification front. In calcified zone a shift to mainly extractable hyaluronic acid occurred. The significance of these findings is discussed.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 3
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    Springer
    Calcified tissue international 10 (1972), S. 223-237 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Ageing ; Cartilage ; Glycosaminoglycans ; Osteoarthritis
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les glycosaminoglycanes du cartilage articulaire des condyles fémoraux de 119 cas d'autopsies humaines ont été isolés et caractérisés par le chlorure de cetylpyridinium. En utilisant la même méthode de colonne, avec micro-échelle, les glycosaminoglycanes sont estimés quantitativement dans le cartilage articulaire normal, de la naissance à l'âge de 95 ans, ainsi que dans des cartilages ostéo-arthritiques. Dans le cartilage normal, le chondroitine sulfate se rencontre sous la forme de chondroitine-4-sulfate et chondroitine-6-sulfate, dont le rapport décroit avec l'âge. Le chondroitine sulfate a un rapport sulfate/acide hexuronique en dessous de l'unité pour les moins de vingt ans et supérieur à l'unité dans les groupes d'âges plus élevés. Deux types de kératane sulfate et d'acide hyaluronique sont isolés dans tous les groupes. Les glycosaminoglycanes de cartilage ostéoarthritique ne montrent pas de différence avec le cartilage normal pour la quantité ou le rapport des isomères. Dans le cartilage normal, on note une décroissance significative des hexosamines totales de la naissance à l'âge de 11–20 par suite de la réduction de chondroitine sulfate. Chez l'adulte, un rapport en voie d'augmentation du kératosulfate plus la fraction glycoprotéique du chondroitine sulfate est observé. Le cartilage ostéo-arthritique montre une réduction de toutes les fractions glycosaminoglycanes sans changement de distribution. Le cartilage normal d'articulations ostéo-arthritiques est inchangé. Des courbes de solubilité indiquent une décroissance en P.M. du chondroitine sulfate dans le cartilage normal de la naissance à 21–30 ans, et une tendance vers des P.M. moins élevés dans le cartilage ostéoarthritique.
    Abstract: Zusammenfassung Die Glycosaminoglycane im Gelenkknorpel der femoralen Condylen von 119 menschlichen Autopsien wurden isoliert. Nachträglich wurden sie mit Hilfe von Cetylpyridinchlorid charakterisiert. Unter Verwendung derselben Säulentechnik als Mikromethode wurden die Glycosaminoglycane quantitativ im Gelenkknorpel von Gesunden von der Geburt bis zum 95. Altersjahr sowie in osteoarthritischem Knorpel gemessen. Im normalen Knorpel trat Chondroitinsulfat als Chondroitin-4-Sulfat und Chondroitin-6-Sulfat auf und das Verhältnis dieser beiden Substanzen nahm mit zunehmendem Alter ab. Unter dem 20. Altersjahr hatte das Chondroitinsulfat ein Sulfat/Hexuronsäure-Verhältnis kleiner als 1, in höheren Altersgruppen größer als 1. Zwei Typen von Keratansulfat und Hyaluronsäure wurden in allen Altersgruppen isoliert. Die Glycosaminoglycane von osteoarthritischem Knorpel zeigten keine Unterschiede zu denjenigen des normalen Knorpels in bezug auf Menge oder Verhältnis der Isomere. Im normalen Knorpel zeigte sich eine signifikante Abnahme der totalen Hexosamine von der Geburt bis zum 11–20. Altersjahr, welche auf eine Verminderung von Chondroitinsulfat zurückzuführen ist. Bei Erwachsenen wurde ein zunehmendes Verhältnis der Keratansulfat + Glycoproteinfraktion von Chondroitinsulfat beobachtet. Osteoarthritischer Knorpel zeigte einen Rückgang aller Glycosaminoglycanfraktionen ohne Änderung der Verteilung. Normaler Knorpel aus osteoarthritischen Gelenken war unverändert. Löslichkeitsprofile deuteten auf vermindertes Molekulargewicht von Chondroitinsulfat in normalem Knorpel von der Geburt bis zum 21.–30. Altersjahr und auf eine Tendenz zu niedrigerem Molekulargewicht in osteoarthritischem Knorpel.
    Notes: Abstract The glycosaminoglycans in articular cartilage from the femoral condyles of 119 human autopsy cases have been isolated and subsequently characterized using cetylpyridinium chloride. Using the same column method in microscale the glycosaminoglycans were estimated quantitatively in normal articular cartilage from birth to 95 years of age and in osteoarthritic cartilage. In normal cartilage chondroitinsulphate occurred as chondroitin-4-sulphate and chondroitin-6-sulphate, decreasing in ratio with age. The chondroitinsulphate had a sulphate/hexuronic acid ratio below unity, below 20 years, above unity in the higher age groups. Two types of keratansulphate and hyaluronic acid were isolated. The glycosaminoglycans isolated from osteoarthritic cartilage showed no differences from normal cartilage as to the amount of their moities of chondroitin sulphate isomers. In normal cartilage there was a significant decrease of total hexosamines from birth to 11–20 years, due to a reduction of chondroitinsulphate. In adults, an increasing ratio of the keratansulphate plus glycoprotein fraction to chondroitinsulphate was observed. Osteoarthritic cartilage showed a significant reduction of all glycosaminoglycan fractions without change of distribution. Normal cartilage taken from osteoarthritic joints was unaltered. Solubility profiles indicated decreases in molecular weight of chondroitin sulphate in normal cartilage from birth to 21–30 years, and a trend towards lower molecular weight in osteoarthritic cartilage.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 4
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    Springer
    Calcified tissue international 12 (1973), S. 16-29 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Bone ; Cartilage ; Culture ; Glycosaminoglycans ; Sephadex ; Collagen ; Electron Microscopy
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Des cultures de monocouches cellulaires d'épiphyses fémorales distales d'embryons de veaux sont étudiées immédiatement après la première sub-culture, réalisée après culture primaire. L'examen au microscope optique classique montre des dépôts disséminés de matériel métachromatique: en microscopie électronique, de fines fibrilles, considérées comme des fibres de collagène, en voie de développement, ont été observées. La nature des sécrétions cellulaires a été étudiée à l'aide de précurseurs radioactifs, fractionnés sur Sephadex G200, ainsi qu'à l'aide de chromatographie par échange d'ions. La digestion enzymatique par hyaluronidase et chondroitinase AC et ABC, bactérienne et testiculaire, démontre que les cellules synthétisent 70% de glycosaminoglycanes sulfatés et 30% de glycosaminoglycanes non sulfatés. Parmi les glycosaminoglycanes, 70% sont constitués par du chondroitine-4-sulfate, 20% par du chondroitine-6-sulfate et le reste probablement par du keratane-sulfate. Les études avec des acides aminés marqués indiquent que les cellules synthétisent une protéine de poids moléculaire élevé, contenant de l'hydroxyleproline, ainsi qu'une protéine non-collagénique, mise en évidence par incorporation de tryptophane.
    Abstract: Zusammenfassung Einschichtige Zellkulturen von der distalen Femurepiphyse von Kalbsembryonen wurden nach der ersten Subkultur untersucht, welche nach der Verschmelzung der primären Kulturen angesetzt wurde. Die lichtmikroskopische Untersuchung zeigte verstreute Ablagerungen von metachromatisch gefärbtem Material; bei der Elektronenmikroskopie wurden feine Fibrillen festgestellt, welche als Collagenvorstufe angesehen wurden. Nach einer Kultur von mehreren Tagen zeigte sich eine lacunäre Anordnung der Zellen. Die Beschaffenheit der Zellsekretionen wurde mittels radioaktiv markierten Verbindungen untersucht, welche auf Sephadex G200 und durch Ionenaustausch-Chromatographie fraktioniert wurden. Die enzymatische Verdauung mit bakterieller und testikulärer Hyaluronidase und Chondroitinase-AC und-ABC zeigte, daß die Zellen 70% sulfatierte und 30% nichtsulfatierte Glycosaminoglycane synthetisierten. Die sulfatierten Glycosaminoglycane enthielten 70% Chondroitin-4-Sulfat, 20% Chondroitin-6-Sulfat, und der Rest war wahrscheinlich Keratansulfat. Untersuchungen mit markierten Aminosäuren-Vorläufern deuteten darauf hin, daß die Zellen ein Hydroxyprolinhaltiges, hochmolekuläres Protein synthetisierten und dazu etwas Eiweiß, bei dem es sich auf Grund des Tryptophaneinbaues nicht um Collagen handeln kann.
    Notes: Abstract Monolayer cell cultures from the distal femoral epiphyses of embryo calves were studied following the first subculture, which was carried out after confluence in primary culture. Light microscopic examination revealed scattered deposits of metachromatic-staining material; on electron microscopy fine fibrils considered to be developmental collagen were seen. After several days in culture lacuna-like patterns of cells were seen. The nature of the cell secretions were studied by radioactive precursors, which were fractionated on Sephadex G200 and by ion exchange chromatography. Enzyme digestion with bacterial and testicular hyaluronidase and chondroitinase-AC and-ABC revealed that the cells synthesized 70% sulphated, and 30% non-sulphated glycosaminoglycans. Of the sulphated glycosaminoglycans 70% was chondroitin-4-sulphate, 20% chondroitin-6-sulphate, and the remainder probably keratansulphate. Studies were labelled amino acid precursors suggested that the cells synthesized a high-molecular weight protein containing hydroxyproline, as well as some non-collagenous protein, shown by tryptophan incorporation
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 5
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 49-58 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Glycosaminoglycans ; Intracellular ; Chondrocytes ; Cartilage ; Embryonal ; Bone
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les glycosaminoglycanes acides de chondrocytes isolés, en suspension, sont étudiés. La matrice extracellulaire est isolée par traitement successif à la trypsine et à la collagénase d'os d'embryons de poulet, âges de 15 à 17 jours. Après digestion à la papaïne et élimination des acides nucléïques par traitement à la DNAse et à la RNAse, les glycosaminoglycanes sont précipités par le CPC et isolés sous la forme de leur sel sodique. Les analyses des propriétés de solubilité du CP glycosaminoglycane par le microfractionnement d'Antonopoulos et coll. (1964) révèlent la présence de glycosaminoglycanes intracellulaires de poids moléculaire et/ou de densité de charge nettement plus faibles que ceux de la matrice extracellulaire. Sur des électrophorèses de microzones, une petite partie des glycosaminoglycanes intracellulaires isolées présente une mobilité similaire à celle des solutions témoins de sulfate de chondroitine, alors que la portion la plus importante ne se déplace qu'à mi-distance de l'acide hyaluronique et montre une large trainée, indiquant une faible charge négative. Ce fait semble dû à une perte de l'influence de régulation des composants matriciels éliminées, sur la synthèse des glycosaminoglycanes et au rejet dans le milieu de glycosaminoglycanes initialement synthétisé. Pour la première fois, une faible quantité d'acide hyaluronique intracellulaire est mise en évidence par une mobilité électrophorétique typique.
    Abstract: Zusammenfassung Saure Glykosaminoglycane von isolierten Chondrocyten in Suspension wurden untersucht, und die extracelluläre Matrix von 15–17 Tage alten Knochen von Kükenembryos wurde durch die aneinanderfolgende Behandlung mit Trypsin und Collagenase erhalten. Nach der Papain-Verdauung und Beseitigung der Nucleinsäuren mittels DNS- und RNSase-Behandlung wurden die Glykosaminoglycane mit CPC gefällt und als Natriumsalz isoliert. Untersuchungen der Löslichkeit der CP-Glykosaminoglycane mittels des Mikrofraktionierungsverfahrens von Antonopouloset al. (1964) zeigten intracelluläre Glykosaminoglycane mit meist niedrigerem Molekulargewicht und/oder niedrigerer Ladungsdichte als diejenigen der extracellulären Matrix. In der Mikro-Zonen-Elektrophorese zeigte nur ein kleiner Teil der isolierten intracellulären Glykosaminoglycane eine Mobilität, die dem Standard des Chondroitinsulfats entsprach. Der größte Teil legte nur die halbe Distanz der Hyaluronsäure zurück und zeigte breites “Tailing”, was auf eine niedrigere negative Ladung hindeutet. Die Ursache dafür wurde interpretiert als Verlust eines regulierenden Einflusses der entfernten Matrixkomponenten auf die Glykosaminoglycan-Synthese und als Abgabe ursprünglich synthetisierter Glykosaminoglycane in das Medium. Es wurde erstmals, anhand der typischen elektrophoretischen Beweglichkeit, eine kleine Menge von intracellulärer Hyaluronsäure nachgewiesen.
    Notes: Abstract Acid glycosaminoglycans were studied from isolated chondrocytes in suspension and the extracellular matrix obtained by sequential trypsin and collagenase treatment of 15- to 17-day-old embryonic chick bone. After papain digestion and removal of the nucleic acids by treatment with DNAse and RNAse, the glycosaminoglycans were precipitated by CPC and isolated as their sodium salt. Analyses of the CP-glycosaminoglycan solubility properties with the microfractionation procedure of Antonopouloset al. (1964) showed intracellular glycosaminoglycans of predominantly lower molecular weight and/or charge density than those of extracellular matrix. On micro-zone electrophoresis, only a minor part of the isolated intracellular glycosaminoglycans showed a mobility similar to that of the chondroitin sulphate standards while the major part moved only half the distance of hyaluronic acid and showed broad tailing, indicating a low negative charge. This was considered to be due to loss of a regulatory influence of the removed matrix components upon glycosaminoglycan synthesis and to release of originally synthesized glycosaminoglycans into the medium. For the first time, a small amount of intracellular hyaluronic acid was shown by typical electrophoretic mobility.
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  • 6
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    Springer
    Calcified tissue international 9 (1972), S. 194-199 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Growth plate ; Glycosaminoglycans ; Chondroitin sulfate ; Keratan sulfate ; Cartilage
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les concentrations de chondroitine-4-sulfate (C-4-S), chondroitine-6-sulfate (C-6-S) et kératane sulfate (KS) sont déterminées au niveau du cartilage métaphysaire provenant de lapins de 2 groupes d'âge, et de 3 zones métaphysaires de lapins d'âge identique. Avec l'augmentation de l'âge, la concentration de C-4-S augmente, C-6-S décroit et KS reste constant. Il n'y a pas de variation lorsque trois métaphyses différentes sont étudiées. Le radiosulfate qui se fixe comme chondroitane sulfate est aussi déterminé: on note ainsi un rapport inverse de la concentration en fonction de l'augmentation de l'âge.
    Abstract: Zusammenfassung Im Knorpel aus Wachstumsplatten von Kaninchen zweier verschiedener Alter wurden das Chondroitin-4-Sulfat (C-4-S), das Chondroitin-6-Sulfat (C-6-S) und das Keratansulfat (KS) bestimmt; die selben Bestimmungen wurden auch in drei verschiedenen Zonen der Wachstumsplatte bei Kaninchen von gleichem Alter ausgeführt. Bei zunehmendem Alter stieg die C-4-S-Konzentration, die C-6-S-Konzentration nahm ab und die KS-Konzentration blieb konstant. Innerhalb der drei an verschiedenen Zonen der Wachstumsplatte vorgenommenen Bestimmungen fanden sich keine Unterschiede. Die Aufnahme von Sulfat (mit35S markiert) als Chondroitinsulfat wurde ebenfalls bestimmt; diese zeigte ein entgegengesetztes Verhältnis zwischen Konzentration und zunehmendem Alter.
    Notes: Abstract Chondroitin-4-sulfate (C-4-S), chondroitin-6-sulfate (C-6-S) and keratan sulfate (KS) concentrations were measured in growth plate cartilage derived from rabbits of two different ages, and from three growth plate zones from rabbits of the same age. With increasing age, the concentration of C-4-S increased, C-6-S decreased and KS remained constant. There was no variation when three different growth plate zones were sampled. Radiosulfate uptake into chondroitan sulfate was also measured, and this showed an inverse relationship to concentration with increasing age.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 7
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Morphology ; Glycosaminoglycans ; Cartilage ; Chemistry ; Audioradiography ; Healing
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Une perte de substance ostéo-cartilagineuse, de taille limitée et identique, est réalisée chez le lapin adulte et la cicatrisation est étudiée histologiquement et par autoradiographie après marquagein vitro au35S-sulfate. Une analyse microchimique est pratiquée pour le contenu et la composition en glycosaminoglycanes. 1. Entre la première semaine et la 4ème et 8ème semaine, un tissu conjonctif non-métachromatique se différencie en un cartilage métachromatique et la quantité de sulfate de chondroitine augmente de façon significative aux dépens des glycoprotéines. 2. Jusqu'à la 4ème semaine, la perte de substance est surtout comblée par de l'os néoformé: après cette période, la région est comblée au delà de la limite de la surface articulaire. 3. Le cartilage hyalin, ressemblant morphologiquement, autoradiographiquement et chimiquement au cartilage articulaire, en ce qui concerne la distribution en glycosaminoglycanes, constitute la surface articulaire de la perte de substance comblée dans un tiers des cas après 8 semaines. Le cartilage hyalin s'observe surtout dans les régions où de l'os néoformé a comblé la cavité médullaire. 4. Dans les deux tiers des cas, après 8 semaines, les surfaces articulaires des zones comblées comportent, non seulement du cartilage, mais aussi du tissu fibreux se formant essentiellement sur les parties latérales et dans les régions, où la cavité médullaire, fliant face, à la surface articulaire, n'a pas été comblée par du tissue osseux. La fraction glycoprotéique augmente par rapport à la fraction chondroitine sulfate. 5. Dans la majorité des cas, après 20 semaines, le cartilage néoformé subit des phénomènes dégénératifs, qui se traduisent par une diminution en chondroitine sulfate.
    Abstract: Zusammenfassung Bei ausgewachsenen Kaninchen wurde ein begrenzter, standardisierter, osteochondraler Defekt hervorgerufen, und das regenerierte Gewebe wurde histologisch und autoradiographisch durch Markierung in vitro mit35S-Sulfat und durch mikrochemische Bestimmung des Gehaltes und der Zusammensetzung der Glykosaminglykane untersucht. Die wichtigsten Befunde waren: 1. Zwischen 1 und 4–8 Wochen veränderte sich nichtmetachromatisches Bindegewebe zu metachromatisch gefärbtem Knorpel, und der Anteil an Chondroitin-Sulfat nahm auf Kosten der Glykoproteine signifikant zu. 2. Bis zu 4 Wochen war der Hauptteil des defekten Gebietes mit neugebildetem Knochen gefüllt; nach dieser Zeit lag dieser Bezirk oberhalb der Verknöcherungsgrenze in Richtung der Gelenkoberfläche. 3. Nach 8 Wochen bestand die Gelenkoberfläche des defekten Gebietes in einem Drittel der Fälle aus hyalinem Knorpel, der morphologisch, autoradiographisch und chemisch dem Gelenkknorpel in Bezug auf die Verteilung von Glykosaminoglykanen glich. Hyaliner Knorpel wurde hauptsächlich an Stellen beobachtet, wo neugebildeter Knochen die Markhöhle geschlossen hatte. 3. Nach 8 Wochen bestand die Gelenkoberfläche des defekten Gebietes in einem Drittel der Fälle aus hyalinem Knorpel, der morphologisch, autoradiographisch und chemisch dem Gelenkknorpel in Bezug auf die Verteilung von Glykosaminoglykanen glich. Hyaliner Knorpel wurde hauptsächlich an Stellen beobachtet, wo neugebildeter Knochen die Markhöhle geschlossen hatte. 4. Nach 8 Wochen bestanden Teile der Gelenkoberfläche des Defektes in zwei Dritteln der Fälle nicht nur aus Knorpel, sondern auch aus fibrösem Gewebe, welches vor allem in den seitlichen Teilen des Defektes und an Stellen vorlag, wo die Markhöhle gegenüber der Gelenkoberfläche nicht mit Knochengewebe verschlossen worden war. Die Glykoproteinfraktion nahm im Vergleich zur Chondroitin-Sulfatfraktion zu. 5. Nach 20 Wochen zeigten sich in den meisten Fällen bei neugebildetem Knorpel degenerative Veränderungen, welche durch eine gewisse Abnahme des Chondroitin-Sulfats wiedergegeben wurden.
    Notes: Abstract A limited, standardized osteochondral defect was created in adult rabbits and the regenerated tissue was examined histologically and autoradiographically after labellingin vitro with35S-sulphate, and microchemically for its content and composition of glycosaminoglycans. The principal findings were: 1. Between 1 week and 4 to 8 weeks, non-metachromatic connective tissue differentiated to metachromatically stained cartilage, and the proportion of the chondroitin sulphate increased significantly at the expense of the glycoproteins. 2. Up to 4 weeks, the major part of the defect area was filled with newly formed bone; after this time, the area lay above the level of the “tidemark”, towards the articular surface. 3. Hyaline cartilage with morphological, autoradiographic and chemical resemblance to the articular cartilage in terms of the distribution of glycosaminoglycans constituted the articular surface of the defect area in one-third of the cases at observation times after 8 weeks. Hyaline cartilage was observed mainly in areas where newly formed bone had closed the medullary cavity. 4. In two-thirds of the cases, after 8 weeks, parts of the articular surface of the defect consisted not only of cartilage but also of fibrous tissue, occurring mainly in the lateral parts of the defect and in areas where the medullary cavity facing the articular surface had not been sealed by bone tissue. The glycoprotein fraction increased relative to the chondroitin sulphate fraction. 5. In most cases after 20 weeks, newly-formed cartilage underwent degenerative changes, which were reflected in some reduction of the chondroitin sulphate.
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  • 8
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Glycosaminoglycans ; Cartilage ; Transplant ; Microchemistry ; Defect
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Un transplant dans une perte de substance ostéochondrale, mesurant 3×4×3 mm, a été réalisé au niveau de la tête fémorale de lapins adultes. On a transplanté du cartilage costal autologue, qui a été primitivement implanté pendant 4–5 semaines dans le tissu musculaire, et du cartilage costal autologue frais. Après des intervales de temps, variant de 2 à 52 semaines, les animaux sont sacrifiés. Les régions transplantées et les tissus voisins sont étudiés, après microdissection de coupes obtenues après congélation-dessication, à l'aide d'une technique micro-chimique quantitative, permettant d'analyser leur contenu en glycosaminoglycanes et en calcium. Le contenu en hexosamine (en % de poids sec organique) est généralement plus élevé dans les transplants que dans le cartilage articulaire après 2 et 6 semaines: après cette période, ce contenu est identique. La distribution des différentes fractions de glycosaminoglycanes est différente dans les transplants et le cartilage articulaire. Ainsi la fraction de sulfate de glycoprotéine et/ou de kératane est plus faible au niveau du transplant que dans le cartilage articulaire: l'inverse est vrai pour le sulfate de chondroitine. Après des intervalles de temps plus élévés, ces fractions ont tendance à s'égaliser dans le transplant et le cartilage articulaire. Les courbes de solubilité du sulfate de chondroitine présentent une grande similitude. Le contenu en calcium est généralement plus élevé dans le transplant que dans le cartilage articulaire. A partir de 12 semaines, une décroissance nette est observée par rapport au tissu témoi n. Les résultats chimiques indiquent que le cartilage de la région transplanté ne subit pas d'altérations dégénératives nettes.
    Abstract: Zusammenfassung Am Hüftgelenkskopf von erwachsenen Kaninchen wurde ein 3×4×3 mm großer osteochondraler Defekt geschaffen. In diesen wurde autologer Rippenknorpel, welcher zuerst während 4–5 Wochen intramuskulär implantier war, und frischer autologer Rippenknorpel transplantiert. An 6 verschiedenen Beobachtungszeitpunkten zwischen 2 und 52 Wochen wurden die Tiere getötet. Das Ausgangsmaterial, das Gewebe an der Transplantationsstelle auf der Gelenkfläche und der Gelenkknorpel oberhalb der “tidemark” wurden von jedem Tier für sich, nach Mikrodissektion an gefriergetrockneten Gefrierschnitten untersucht. Der Gehalt und die Zusammensetzung der Glykosaminoglykane in diesen Materialien wurde mit einer quantitativen mikrochemischen Technik und der Kalkgehalt mittels einer Ionenaustauschmethode untersucht. Der Hexosamingehalt, ausgedrückt in Prozent des Trockengewichtes, war allgemein etwas höher in den Transplantaten als im Gelenkknorpel an den Beobachtungszeiten 2 und 6 Wochen, danach war dieser sehr gleich. Die gegenseitige Verteilung der verschiedenen Glykosaminoglykan-Fraktionen war unterschiedlich in den Transplantaten und im Gelenkknorpel. Die Glykoprotein- und/oder Keratansulfatfraktion war kleiner in den Transplantaten als im Gelenkknorpel, während das Gegenteil für das Chondroitinsulfat zutraf. Mit steigenden Beobachtungszeiten wurde eine größere Ähnlichkeit zwischen Transplantat und Gelenkknorpel mit Hinsicht auf die relativen Größen dieser Fraktionen offenbar. Die Löslichkeitsprofile des Chondroitinsulfates zeigten weitgehende Gleichheit. Der Kalkgehalt in den Transplantaten war allgemein höher in den Transplantaten als im Gelenkknorpel. Nach Versuchszeiten von 12 Wochen zeigten doch die Transplantate im Vergleich zu dem Ausgangsmaterial einen eindeutigen Abfall der Kalkwerte, wonach diese ziemlich konstant verblieben.
    Notes: Abstract In adult rabbits, a transplant was made to an osteochondral defect on the femoral head measuring 3×4×3 mm of autologous costal cartilage which had first been implanted intramuscularly for 4–5 weeks and fresh autologous costal cartilage. After 6 different observation times between 2 and 52 weeks the animals were killed. The original material, the tissue in the transplant area on the articular surface and the articular cartilage above the “tidemark” were analysed in each individual animal, after microdissection of freeze-dried sections of these structures, by a quantitative microchemical technique for their content and composition of glycosaminoglycans and for their calcium content. The hexosamine content (% per organic dry weight) was generally higher in the transplants than in the articular cartilage at observation times of 2 and 6 weeks, after which time it was similar. The distribution of the different glycosaminoglycan fractions was different in the transplants compared with the articular cartilage. Thus the glycoprotein and/or keratan sulphate fraction was smaller in the transplant than in the articular cartilage, while the opposite held for the chondroitin sulphate. With increasing observation times, some resemblance became evident between the transplant and articular cartilage with respect to the relative size of these fractions. The solubility profiles of the chondroitin sulphate were similar. The calcium content was generally higher in the transplant than in the articular cartilage, after 12 weeks it showed a pronounced decrease in comparison with the original material. The chemical findings indicate that the cartilage in the transplant area did not undergo any marked degenerative changes.
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  • 9
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    Springer
    Calcified tissue international 7 (1971), S. 175-190 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Bone ; Human ; Age ; Glycosaminoglycans
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les glycosaminoglycanes de l'os humain compact du fémur sont identifiés et leur concentration et distribution sont déterminées à partir de cas d'autopsie, d'âges variables, allant du nouveau-né à des sujets de 94 ans. L'absence d'altérations post-mortem des glycosaminoglycanes osseux est déterminée au niveau de l'os fémoral de chien, au bout de 72 heures. Le chondroitine-4-sulfate constitue le glycosaminoglycane majeur de l'os humain: de plus, une fraction mineure semble être constituée par l'acide hyaluronique. Les proportions de glycosaminoglycanes varient inversement en fonction, de l'âge chez des sujets en pleine croissance: mais aucun changement n'est observé plus tardivement. La distribution des glycosaminoglycanes est identique chez les sujets adultes. Seules de faibles différences, concernant cette distribution, sont relevées. Chez les sujets jeunes elles sont, peut-être, liées à des changements de poids moléculaire peu élevés ou au sulfate chondroitine sulfaté, peu élevé et, chez un sujet vieil à une proportion plus grande d'acide hyaluronique.
    Abstract: Zusammenfassung Die Glykosaminoglykane aus menschlicher Compacta des Oberschenkels wurden charakterisiert und ihre Konzentrationen und Muster an Autopsien von Menschen verschiedenen Alters (Neugeborene bis 94jährige) festgelegt. Fällungen mit Cetylpyridin und Fraktionierungsmethoden wurden angewendet. Am Hundefemur konnte festgestellt werden, daß sich das Glykosaminoglykanmuster im Knochen bis zu 72 Std post mortem nicht veränderte. Als wichtigstes Glykosaminoglykan des menschlichen Knochens wurde das Chondroitin-4-sulfat identifiziert; dazu wurde ein kleiner Anteil versuchsweise als Hyaluronsäure eingestuft. Die Konzentrationen der Glykosaminoglykane standen in umgekehrtem Verhältnis zum Alter des im Wachstum stehenden Menschen, jedoch wurde nach dessen Abschluß keine Veränderung mehr beobachtet. Das Glykosaminoglykanmuster sieht für alle erwachsenen Menschen ähnlich aus. Nur kleine Abweichungen von diesem Muster konnten bei jungen Menschen festgestellt werden; möglicherweise sind sie auf eine leichte Änderung im Molekulargewicht oder auf eine schwache Sulfatierung des Chondroitinsulfates zurückzuführen. Dies gilt ebenso für einen alten Menschen, dessen Knochen einen höheren Anteil an Hyaluronsäure aufweisen.
    Notes: Abstract Glycosaminoglycans from human femoral compact bone were characterized and their concentrations and patterns were determined in autopsy cases of various ages, newborn to 94 years of age. Cetylpyridinium precipitation and fractionation methods were used. Absence of postmortem changes of bone glycosaminoglycan pattern for as long as 72 hours was checked on dog femoral bone. Chondroitin-4-sulphate was identified as the predominating glycosaminoglycan of human bone; in addition a minor part was tentatively identified as hyaluronic acid. Concentrations, of glycosaminoglycans were inversely related to age in growing subjects, but no change was noted later in life. The glycosaminoglycan pattern had a similar appearance for all of the adult subjects. Only small deviations from this pattern had a similar for young subjects, possibly due to low molecular weight change or low sulphated chondroitin sulphate; and for one old subjects to a higher proportion of hyaluronic acid.
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    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Glycosaminoglycans ; Chromatography ; Ions ; Ageing
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Notes: Abstract Articular cartilage from the lower femoral epiphysis of human autopsy cases was collected in ten age groups from birth to 95 years and in osteoarthrosis of two grades of severity. By chromatography on Ecteola cellulose columns, the different glycosaminoglycans were separated and keratan sulphate was fractionated. The results are consistent with earlier studies using CPC-cellulose column technique, i.e. a higher content of total hexosamine and chondroitin sulphate was found in early childhood. Furthermore, normal articular cartilage in adults showed a higher content and a higher degree of heterogeneity of keratan sulphate than in childhood. In osteoarthrosis, a decreased content of total hexosamine due to a decrease both of chondroitin sulphate and keratan sulphate was found.
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