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    Digitale Medien
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 317-325 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Calcification ; Neutral sites ; Elastin ; Calcium
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Des études précédentes suggèrent la présence de groupements carboxyles, sulfhydriles et aminés dans les sites de liaison en calcium de l'élastine. La possibilité de l'existence de sites neutres de liaison en calcium au niveau de l'élastine a été étudiée dans ce travail. Une augmentation de la fixation du calcium au niveau de l'élastine est observée après des modifications de dissolution qui ont aussi provoqué des modifications de structure de la protéine. Dans des mélanges méthanol-H2O, les liaisons du calcium semblent indépendantes du pH et de la force ionique. Sur dix ions testés (Ca2+, CO2+, Na2+, Cu2+, Zn2+, Cr3+, Pb+2, K+, Rb+ et Mg2+) seule la liaison du calcium est nettement augmentée, lorsque le méthanol est ajouté. Il semble que les sites neutres sont importants pour les divers rapports entre calcium et élastine et servent, peut-être, comme centres de nucléation au cours de la calcification de la protéine.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Vorgängige Studien haben die Bedeutung der Carboxyl-, Sulfhydryl- und Aminogruppen als Stellen der Calciumbindung im Elastin gezeigt. Die vorliegende Arbeit hatte zum Ziel, die Rolle der neutralen Koordinationsstellen im Elastin als mögliche Calcium-Bindungsseite abzuklären. Die Calciumbindindung an das Elastin wurde durch solche Lösungsmittelveränderungen erhöht, die auch gleichartige Verschiebungen im Proteinmolekül bewirkten. In Methanol-Wasser-Mischungen schien die Calciumbindung nicht von Veränderungen des pH oder der Ionenstärke abhängig zu sein. Von 10 Ionen, bei welchen die Bindung überprüft wurde, war einzig diejenige des Calciums signifikant erhöht, wenn Methanol zugesetzt wurde. Es wird vorgeschlagen, daß die neutralen Stellen für die verschiedenen Vorgänge, bei welchen Calcium und Elastin beteiligt sind, eine wichtige Rolle spielen und vielleicht für die Verkalkung der Proteine als Nukleationszentren in Frage kommen.
    Notizen: Abstract Previous studies have implicated carboxyl groups, sulphhydryl groups and amino groups as the sites for calcium binding in elastin. In this study, the concept was investigated that neutral co-ordinating sites in elastin may also provide calcium binding sites. Calcium binding to elastin was increased upon solvent changes which also effected conformational changes in the protein. In methanol-H2O mixtures calcium binding appeared to be independent of changes in pH and ionic strength. Of ten ions tested (Ca2+, Co2+, Na+, Cu2+, Zn2+, Cr3+, Pb+2, K+, Rb+, and Mg2+), only calcium binding was significantly increased when methanol was added. It is proposed that neutral sites are important to the various relationships involving calcium and elastin and perhaps serve as nucleation centers in the calcification of the protein.
    Materialart: Digitale Medien
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  • 2
    Digitale Medien
    Digitale Medien
    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 227-237 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Kinetics ; Calcification ; Secretion ; Protistan ; Coccolith
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Notizen: Abstract The calcified body scale (coccolith) of the unicellular marine algaHymenomonas carterae is composed of two morphologically distinct calcite elements which alternate about the perimeter of a complex, elliptical organic base. The coccoliths ofHymenomonas are formed intracellularly in a precise and orderly sequence of events within the single Golgi apparatus of the alga and then secreted to the anterior cell surface. This study demonstrates that the kinetics of this calcification-secretion process can be reproducibly determined by morphological means. Under standardized conditions, coccoliths are secreted at a rate of about ten per hour. In the absence of light this rate is significantly reduced. The procedure described for determining the kinetics of coccolith secretion inHymenomonas provides a simple, precise method for evaluating the results of experimental manipulation of this calcification-secretion system.
    Materialart: Digitale Medien
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  • 3
    Digitale Medien
    Digitale Medien
    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 59-71 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Apatite ; Calcification ; Pineal gland ; Calcospherulites ; Calculi
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Notizen: Abstract Calcifications of the pineal gland in the form of calcospherulites have been studied by optical microscopy, electron microscopy, electron probe analysis, X-ray diffraction, thermogravimetry, and infra-red and chemical analysis. Complex calcospherulite textures have been observed which have a granular substructure made up of apatite crystals averaging 218 Å in length and 38 Å in width. These apatite crystals appear to be a carbonate-containing hydroxyapatite, mineralogically similar to enamel.
    Materialart: Digitale Medien
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  • 4
    Digitale Medien
    Digitale Medien
    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 109-127 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Dentinogenesis ; Diphosphonates ; Calcification ; Collagen ; Electron Microscopy
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Notizen: Abstract The effects of high doses of ethylene-1-hydroxy-1,1-diphosphonate (EHDP) were investigated at the light microscopic and subcellular level. The administration of EHDP at a concentration of 7.5–10 mg P/kg body weight/day over a short period of time resulted in complete inhibition of crystal formation in predentin and pre-enamel. An increased predentin width was observed and within newly-formed predentin areas the formation ofcollagen fibrils was grossly disturbed. In addition, fine precipitates appeared in the ground substance. The presence of unusual thread-like elements within specific bodies in the cytoplasm of the odontoblastic processes may be indicative of an interference by EHDP in e.g. the synthesis of precollagen. The possibility of an inhibition by EHDP of the extracellular aggregation of collagen molecules is also discussed. EHDP further inhibited crystal formation within dentinal globules. Functioning ameloblasts were grossly affected in EHDP-treated rats, and it is suggested that this is related to an inhibition of crystal formation in pre-enamel.
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  • 5
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 229-244 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Teeth-enamel ; Histocytochemistry ; Calcification
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Des études histochimiques et d'affinités tinctoriales sont menées sur des germes dentaires de foetus de veauxin situ, fixés dans du chlorure de cyanure ou du formol. La concentration en protéine décroit avec la maturation de l'émail. Le tissue est divisé en deux bandes distinctes: une région externe d'émail nouvellement formé et une région interne d'émail en maturation. L'émail mature, défini antérieurement par méthode biochimique, n'a pas été étudié. L'histidine, présente dans l'émail, est aisément traitée par l'iode: le traitement au benzol n'a pas d'effet. La tyrosine est mise en évidence par deux méthodes dans les deux types d'émail et décroit légèrement au cours de la maturation. La transition est progressive. Des groupements sulfhydriles sont présents dans l'émail jeune, mais non dans l'émail en voie de maturation, avec une transition nette entre les deux zones. Le tryptophane est présent dans toute l'épaisseur de l'émail. L'arginine ne réagit pas bien par la méthode de Sakaguchi, mais on peut la mettre en évidence en bloquant par la fluorodinitrobenzène les colorants anioniques. La lysine est présente et diminue avec la maturation. Les résidus d'acide carboxyliques sont mis en évidence dans les deux types d'émail, mais des bandes distinctes et moins de résidus sont observés au cours de la maturation. Les affinités tinctoriales anioniques à diverses concentrations de sels montrent que la concentration critique en électrolytes de l'émail est relativement élevée et semblable à celle de la kératine. Les affinités tinctoriales cationiques indiquent que l'ionisation des groupements d'acide carboxylique peut être supprimée dans l'émail jeune, mais non dans l'email en voie de maturation. L'émail jeune a les caractéristiques histochimiques d'une kératine, mais non pas l'émail mature, qui ressemble à un groupe de protéines globulaires ectodermiques.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Histochemische Methoden und Farbbindungs-Untersuchungen wurden an Zahnkeimen von Kalbsembryonen in situ, welche in Cyanurchlorid oder Formalin fixiert worden waren, ausgeführt. Die Proteinkonzentration nahm mit dem Reiferwerden des Schmelzes ab. Das Gewebe wurde in zwei genau abgegrenzte Bänder unterteilt, einen äußeren Bereich aus neu gebildetem Schmelz und einen inneren Bereich aus reifendem Schmelz. Was früher biochemisch als reifer Schmelz definiert wurde, wurde nicht untersucht. Histidin lag im Schmelz vor und konnte leicht iodiert werden, eine Benzoilierung fand jedoch nicht statt. Zwei verschiedene Tyrosinanalysen bestätigen dessen Gegenwart in neugebildetem und reifendem Schmelz, wobei es aber beim Reifeprozess etwas abnahm. Der Übergang zeigte sich fließend. Sulphydryl-Gruppen waren in neugebildetem, aber nicht in reifendem Schmelz vorhanden, wobei sich ein abrupter Übergang zwischen den beiden Zonen fand. Tryptophan konnte durch die gesamte Schmelzbreite nachgeweisen werden. Argininrückstände reagierten kaum auf die Sakaguchi-Methode, aber sie konnten durch die anionische Farbstoffe blockierende Fluorodinitrozenzen-Methode nachgewiesen werden. Lysin war anwesend und nahm im Laufe des Reifeprozesses ab. Carboxylsäure-Rückstände wurden in reifendem und neugebildetem Schmelz nachgewiesen, jedoch mit scharfer Abgrenzung und deutlich weniger Rückständen in reifendem Schmelz. Die Bindung mit anionischen Farbstoffen bei verschiedenen Salzkonzentrationen zeigte, daß die kritische Elektrolyten-Konzentration nicht besonders hoch und derjenigen von Keratin ähnlich ist. Untersuchungen mit kationischen Farbstoffen deuteten an, daß die Ionisierung von Carboxylsäure-Gruppen in neugebildetem, nicht aber in reifendem Schmelz, unterdrückt werden kann. Neugebildeter Schmelz hat die histochemische Eigenschaften von Keratin; reifender Schmelz hingegen hat diese Eigenschaft nicht und gleicht eher einem Vertreter der Gruppe der ektodermalen globulären Proteine.
    Notizen: Abstract Histochemical methods and dye binding studies were carried out on foetal calf tooth germsin situ fixed in cyanuric chloride or formalin. Protein concentration decreased upon maturation of enamel. The tissue was divided into two distinct bands, an outer region of newly formed enamel and an inner region of maturing enamel. What has previously been defined biochemically as mature enamel was not investigated. Histidine was present in enamel and easily iodinated but protected from benzoylation. Two methods for tyrosine analysis confirm its presence in both newly formed and maturing enamel but with some decrease upon maturation. The transition was gradual; Sulphydryl groups were present in newly formed, but not in maturing, enamel, with abrupt transition between the two zones. Tryptophane was demonstrated throughout the entire thickness of enamel. Arginine residues were not very reactive to Sakaguchi's method but they were demonstrable by fluorodinitrobenzene blockade of anionic dyes. Lysine was present, decreasing upon maturation. Carboxylic acid residues were demonstrated in both maturing and newly formed enamel but with distinct banding and noticeably fewer residues in maturing enamel. Anionic dye binding at various salt concentrations showed that the critical electrolyte concentration of enamel is moderately high and similar to that of keratin. Cationic dye binding studies indicated that ionization of carboxylic acid groups in newly formed enamel, but not maturing enamel, might be suppressed. Newly formed enamel has the histochemical characteristics of a keratin but maturing enamel does not, more nearly resembling one of a group of ectodermal globular proteins.
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  • 6
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 275-281 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Calcification ; Cartilage ; Lipids ; Membranes ; Vesicles
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les vésicules matricielles sont des particules extracellulaires, entourées par une membrane, qui sont nombreuses dans la matrice du cartilage en voie de calcification et qui sont en rapport morphologique avec le dépôt minéral. Les vésicules matricielles et les cellules de l'épiphyse d'os longs d'embryons de veaux sont libérées par digestion grâce à la collagénase et séparées par centrifugation différentielle. Les vésicules ainsi obtenues sont riches en lipides et contiennent significativement plus de sphingomyéline et phosphatidyl sérine que les fractions cellulaires. Le rapport moles de cholestérol sur moles de phospholipides totaux est plus élevé dans les vésicules que dans les cellules; ce résultat est en accord avec l'origine des vésicules au niveau des membranes cellulaires des chondrocytes.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Matrixvesikel sind extrazelluläre, membrangebundene Teilchen, welche in der Matrix von verkalkendem Knorpel gehäuft vorkommen und welche in morphologischem Zusammenhang mit der Mineralablagerung in diesem Gewebe stehen. Matrixvesikel und Epiphysenzellen aus Röhrenknochen von Kalbsembryonen wurden mittels Collagenaseverdauung freigesetzt und durch Differential-Zentrifugierung getrennt. Die Vesikelpräparate waren reich an Lipidien und enthielten bedeutend mehr Sphingomyelin und Phosphatidylserin als die Zellfraktionen. Das molare Verhältnis Cholesterol/Gesamtlipide war in den Vesikeln höher als in den Zellen; dieser Befund stimmt mit der Tatsache überein, daß die Vesikel ihren Ursprung in den Plasmamembranen der Chondrozyten haben.
    Notizen: Abstract Matrix vesicles are extracellular, membrane-bounded particles which are abundant in the matrix of calcifying cartilage and which are morphologically related to the deposition of mineral in this tissue. The matrix vesicles and cells of the epiphyses of the long bones of fetal calves were liberated by digestion with collagenase and separated by differential centrifugation. Vesicle preparations were found to be lipid-rich and to contain significantly more sphingomyelin and phosphatidyl serine than cellular fractions. The ratio, moles cholesterol to moles total phospholipid, was higher in vesicles than in cells, a finding which is consistent with vesicles having their origins in the plasma membranes of the chondrocytes.
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  • 7
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    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 93-107 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Dentinogenesis ; Globules ; Pyrophosphatase ; Calcification ; Electron microscopy
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Notizen: Abstract Three-day-old rats were fixed by perfusion with glutaraldehyde and thin slices were cut of the first molar germs. The slices were treated with EDTA and “activated” with buffered solutions containing Mg2+, Ca2+ or Zn2+. Incubation was carried out in buffered solutions (pH 8.5) containing inorganic pyrophosphate and Pb2+. In the Mg2+-activated specimens incubation products were localized to the plasma membranes in the stratum intermedium and the subodontoblastic area. Lead deposits were found on the periphery of the dentinal globules. Incubation products were more randomly distributed in Ca2+-activated specimens whereas those activated with Zn2+ displayed a deposition of lead precipitates mainly corresponding to that seen after activation with Mg2+. The findings are discussed in reference to the localization of alkaline phosphatase in the dentin-producing tissues and it is proposed that the results are indicative of the presence of an inorganic pyrophosphatase in these tissues.
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  • 8
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    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 169-182 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Histochemistry ; Alkaline phosphatases ; Calcification ; Bone ; Teeth
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Notizen: Abstract Activity of alkaline phosphatases in unfixed cold microtome setions from the lower first molar area of newborn mice was recorded by histochemical methods. A substrate specificity test included the following phosphate compounds: ATP, CTP, GTP, UTP, ADP, AMP, GP, PPi, MDP and naphthol AS-TR phosphate. Intense staining was obtained in osteoblasts, stratum intermedium of the enamel organ and odontoblasts with all the substrates, except PPi and MDP. Staining of skeletal muscle fibres was obtained only with triphosphates as substrates. Addition of-SH groups decreased the hydrolysis of triphosphate compounds in cells involved in mineralization while the hydrolysis of monophosphate was inhibited. In contrast triphosphatase activity in striated muscle was enhanced when-SH compounds were added. Demineralization with EDTA diminished the cytoplasmic staining but induced a nuclear staining in hard tissue forming cells when triphosphates were used as substrates. No cytoplasmic and only slight nuclear staining was seen with GP or AMP as substrates. The triphosphate hydrolyzing capacity of tongue muscle fibres was, however, increased after the decalcification treatment. Addition of Mg2+ ions to the incubation media distinctly lowered the hydrolysis of triphosphates in the investigated tissues whereas the hydrolysis of ADP, AMP, GP and naphthol AS-TR phosphate remained unchanged. In view of the findings the triphosphatase activities at alkaline pH of muscle fibres and of cells related to hard tissue formation are considered to be due to activity of separate enzymes. The orthophosphate liberating enzyme activities at alkaline pH in osteoblasts, stratum intermedium and odontoblasts may be expressions of the catalytic functions of one common enzyme. Furthermore, the results indicate that CaATP might be the substrate used by the alkaline ATPase in mineralizing areas.
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  • 9
    Digitale Medien
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 31-48 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Bone ; Cartilage ; Calcification ; Collagen ; Phosphate
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Une méthode pour l'étude de la croissance des os longs de foetus de rat, en culture d'organe, dans un milieu chimiquement défini, a été mise au point. Les extrémités cartilagineuses et les parties centrales de l'os sont analysées séparément pour leur croissance et minéralisation en étudiant leur contenu en collagène, calcium et phosphate, poids sec, et incorporation de proline marquée en hydroxyproline. La croissance et la minéralisation des parties centrales osseuses sont plus lentes dans un milieu chimiquement défini qu'in vivo. La croissance peut être accélérée en ajoutant au milieu des acides aminés non essentiels, de l'albumine ou du sérum. Les extrémités cartilagineuses présentent une augmentation plus importante en poids et contenu en collagène que les parties centrales et l'adjonction de diverses substances a moins d'effet sur la croissance. La croissance et la minéralisation des parties centrales sont augmentées en élevant la concentration du milieu en phosphate de 1.5 à 4.5 mM, avec ou sans adjonction de sérum ou d'albumine. A une concentration faible de calcium (0.5 mM), la croissance et la minéralisation des parties centrales sont arrêtées. A une concentration faible en magnésium (0.5 mM), la minéralisation est augmentée, mais la croissance est arrêtée.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Es wird eine Methode beschrieben, mit welcher das Wachstum der Röhrenknochen von Rattenembryos in einem chemisch bestimmten Medium in Organkultur untersucht werden kann. Die Knorpelenden und Knochenschäfte wurden gesondert auf Wachstum und Mineralisation geprüft, indem Collagen-, Calcium- und Phosphatgehalt, das Trockengewicht und der Einbau von markiertem Prolin in Hydroxyprolin gemessen wurden. Wachstum und Mineralisation des Knochenschaftes waren langsamer in einem chemisch bestimmten Medium als in vivo. Das Wachstum konnte beschleunigt werden, indem dem Medium nicht-essentielle Aminosäuren, Albumin oder Serum beigegeben wurden. Die Knorpelenden zeigten eine viel stärkere Zunahme an Gewicht und Collagengehalt als die Schäfte, und Anreicherung des Mediums hatte weniger Wirkung auf ihr Wachstum. Das Wachstum und die Mineralisation der Knochenschäfte nahmen zu, wenn die Phosphatkonzentration im Medium zwischen 1,5 und 4,5 mM erhöht wurde, und zwar unabhängig davon, ob dem Medium Serum oder Albumin beigegeben wurde oder nicht. Bei niederer Calciumkonzentration (0,5 mM) im Medium wurden Wachstum und Mineralisation der Knochenschäfte beeinträchtigt. Bei niedriger Magnesiumkonzentration (0,5 mM) wurden die Mineralisation erhöht, das Wachstum hingegen gehemmt.
    Notizen: Abstract A method for studying the growth of fetal rat long bones in a chemically defined medium in organ culture is described. Cartilage ends and bone shafts were analyzed separately for growth and mineralization by measuring the collagen, calcium, and phosphate content, dry weight, and incorporation of labeled proline into hydroxyproline. Growth and mineralization of the bone shaft were slower in a chemically defined medium thanin vivo. Growth could be enhanced by supplementation of the medium with non-essential amino acids, albumin or serum. Cartilage ends showed a greater increase in weight and collagen content than the shafts, and medium supplements had less effect on their growth. Bone shaft growth and mineralization were enhanced by increasing medium phosphate concentration over a range of 1.5 to 4.5 mM whether or not the medium was supplemented with serum or albumin. At a low medium calcium concentration (0.5 mM) bone shaft growth and mineralization were impaired. At a low magnesium concentration (0.5 mM) mineralization was enhanced, but growth was impaired.
    Materialart: Digitale Medien
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  • 10
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Dentin ; Calcification ; Pyrophosphate ; Enzyme
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Après incubation de coupes de germes de molaires de rats, fixés aux aldéhydes, dans une solution alcaline de pyrophosphate de plomb, une réaction positive de coloration au sulfure est localisée au niveau du front de minéralisation de la dentine, dans le stratum intermedium et les cellules sous-odontoblastiques. Au microscope électronique, le nombre et la taille de cristaux, en forme d'aiguilles, sont augmentés dans la zone en voie de minéralisation (denture intermédiaire). Un fin précipité est surtout observé dans les noyaux du stratum intermedium et les cellules sous-odontoblastiques. Les effects de l'EDTA, Zn2+, Ca2+, Mg2+ et citrate sont aussi étudiés et la probabilité d'activité en pyrophosphatase inorganique est discutée en fonction des dépôts de plomb observés. L'action d'une pyrophosphatase inorganique sur la précipitation du phosphate de plomb ne peut être exclue. Cependant, la réaction de coloration peut être aussi due à une absorption non catalysée de composé de plomb sur les cristaux d'apatite.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Schnitte von Ratten-Molarkeimen, die mit Aldehyd fixiert und in einer alkalischen Blei-Pyrophosphat-Lösung inkubiert wurden, zeigten an folgenden Stellen eine positive Sulfid-Färbungsreaktion: in der Mineralisierungsfront des Dentins, im Stratum intermedium, und in den subodontoblastischen Zellen. Elektronenmikroskopisch waren Anzahl und Größe der sichtbaren, nadelartigen Kristallite in der Mineralisationszone (intermediäres Dentin) erhöht. Ein feiner Niederschlag konnte vorwiegend in den Nuclei des Stratum intermedium und der subodontoblastischen Zellen beobachtet werden. Es wurde zudem die Wirkungsweise von EDTA, Zn2+, Ca2+, Mg2+ und Zitrat untersucht. Schließlich wird die Wahrscheinlichkeit einer Aktivität von anorganischer Pyrophosphatase im Zusammenhang mit den beobachteten Bleiablagerungen besprochen. Daß anorganische Pyrophosphatase bei der Fällung von Bleiphosphat eine Rolle Spielt, ist nicht auszuschließen. Allerdings kann die Farbreaktion auch durch nicht-katalysierte Adsorption der Bleiverbinding an die Apatitkristalle bedingt sein.
    Notizen: Abstract After incubation of aldehyde-fixed sections of rat molar germs in an alkaline solution of lead pyrophosphate, a positive sulphide staining reaction was observed in the mineralization front of the dentin, in the stratum intermedium, and in the subodontoblastic cells. In the electron microscope, the number and size of visible needle-like crystallites was increased in the mineralization zone (intermediate dentin). A fine precipitate was observed predominantly in the nuclei of the stratum intermedium and subodontoblastic cells. The effects of EDTA, Zn2+, Ca2+, Mg2+ and citrate were also studied and the probability of inorganic pyrophosphatase activities is discussed in relation to the observed lead deposits. The interaction of an inorganic pyrophosphatase cannot be excluded in the precipitation of lead phosphate. However, the staining reaction may also be due to uncatalyzed adsorption of the lead compound onto the apatite crystals.
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