Bestimmung von Aldosteron im Plasma des Menschen unter Verwendung der Kombination Gas-Chromatographie/Massenspektrometrie

Abstract

The method is based on the principle of isotope dilution: a known amount of isotopically labelled standard ([4-¹⁴C]-aldosterone) is added to the plasma sample. After purification of the aldosterone fraction and formation of a suitable derivative, the ratio of isotopes (¹²C/¹⁴C) is measured by mass spectrometry. The analytical procedure consists of the following steps: 1. Chromatography of the plasma sample (10 ml) on Amberlite XAD-2, 2. formation of the acetal of aldosterone, 3. purification of the acetal by a single thin-layer chromatography, 4. formation of the heptafhuorobutyrate of the aldosterone acetal, 5. combined gas chromatography/mass spectrometry. The lower limit of detection is at 100 pg/10 ml plasma. Because of its high specificity, the present method is recommended as a reference method. 10 determinations can be carried out per working day.

Zusammenfassung

Es wird eine gas-chromatographisch-massenspektrometrische Methode zur Bestimmung von Aldosteron in Plasma des Menschen beschrieben. Bei diesem Verfahren wird das Prinzip der Isotopenverdünnung verwendet: Eine bekannte Menge isotopenmarkierter Standardsubstanz ([4-¹⁴C]Aldosteron) wird der zu untersuchenden Plasmaprobe zugesetzt. Nach Anreicherung der Aldosteronfraktion und Bildung eines geeigneten Derivats wird mit dem Massenspektrometer das Isotopenverhältnis (¹²C/¹⁴C) bestimmt. Die Analyse umfaßt folgende Schritte: 1. Chromatographie der Plasmaprobe (10 ml) an Amberlite XAD-2,2. Bildung des Aldosteron-Vollacetals, 3. Reinigung des Vollacetals durch einmalige Dünnschicht-Chromatographie, 4. Bildung des Heptafluorbutyrats des Vollacetals, 5. Kombinierte Gas-Chromatographie/Massenspektrometrie. Die untere Nachweisgrenze liegt bei 100 pg/10 ml Plasma. Auf Grund seiner hohen Spezifität ist das Verfahren als Referenzmethode geeignet. Pro Arbeitstag können 10 Bestimmungen durchgeführt werden.