Skip to main content
SpringerLink
Log in

Histochemischer Nachweis hydrolytischer Enzyme mit Hilfe der Azofarbstoffmethode

Untersuchungen zur Methodik und Vergleichenden Histotopik der Esterasen und Phosphatasen bei Wirbeltieren

  • Published:
Zeitschrift für Zellforschung und mikroskopische Anatomie Abt. Histochemie Aims and scope Submit manuscript

Zusammenfassung

1. Die vorliegende Arbeit berichtet über systematische histoenzymatische Untersuchungen und befaßt sich mit grundsätzlichen und methodischen Problemen sowie mit Untersuchungen zur vergleichenden Histoenzymatik beim Menschen und verschiedenen warmblütigen Wirbeltieren.

2. Der histochemische Nachweis hydrolytischer Enzyme (Phosphatasen und Esterasen) erfolgt mit Hilfe derAzofarbstoffmethoden. Dieselben beruhen im Prinzip auf der Sichtbarmachung der enzymatisch abgespaltenen phenolischen Komponente geeigneter Substratester durch direkte Kupplung mit einer Diazoniumverbindung zu einem Azofarbstoff.

3. Auf diemethodischen Grundlagen histochemischer Enzymnachweise wird durch Besprechung derArtefaktbildungen, derautolytischen Veränderungen sowie der Methoden zurGewebsfixierung undSchnittherstellung auf Grund eigener systematischer experimenteller Untersuchungen eingegangen.

4. Die eigentlichen Nachweisreaktionen werden unter theoretischen und praktischen Aspekten im einzelnen dargestellt. Untersuchungen mit zahlreichen verschiedenenDiazoniumverbindungen führten zu einer Verbesserung einiger Enzymnachweise, vor allem im Hinblick auf eine exakte topographische Lokalisation der Enzymaktivität im Gewebe.

5. Die auf diese Weise fundierten Methoden wurden zum Studium dervergleichenden Histotopik von Phosphatasen und Esterasen in Milz, Leber, Niere und Pankreas des Menschen und verschiedener warmblütiger Wirbeltiere herangezogen.

Dabei werden zum Teil auffallend unterschiedliche Enzymmuster in den gleichen Organen verschiedener Tierarten festgestellt. Besonders auffallende und neuartige Befunde konnten in bezug auf die Enzymverteilung in Milz und Pankreas erhoben werden.

Diese Untersuchungen sind Grundlagen für weitere experimentelle Arbeiten im Rahmen allgemein-pathologischer Studien.

6. Es wird auf die Bedeutung der Enzymhistochemie im Rahmen einer funktionellen Morphologie und Pathologie hingewiesen und in diesem Zusammenhang über Enzymbefunde bei derTuberkuloseinfektion des Menschen und der Laboratoriumstiere berichtet. Die unterschiedliche Enzymverteilung in den Epitheloidzellen verschiedener Arten scheint Beziehungen zwischen konstitutiver Enzymausrüstung und natürlicher Resistenz gegenüber der Infektion aufzuzeigen.

Summary

The present paper deals with the application of azo dye methods in enzyme histochemistry for the demonstration of phosphatases and esterases. After a discussion of general technical problems the results of systematic experiments on artifacts, autolysis, fixation and enzyme reactions are reported. By application of new diazonium salts an improvement in enzyme localization has been achieved.

These improved methods have been applied to a comparative study on the enzyme pattern in normal liver, kidney, spleen, pancreas and tuberculous lesions in lymphnodes. As a result the organs of different species show a marked variation in enzyme content and distribution.

This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.

Access this article

Log in via an institution

Price excludes VAT (USA)
Tax calculation will be finalised during checkout.

Instant access to the full article PDF.

Institutional subscriptions

Literatur

  • Bargmann, W.: Zur Kenntnis der Hülsenkapillaren der Milz. Z. Zellforsch.31, 630–647 (1941).

    Google Scholar 

  • Barnett, R. J., andA. M. P. Seligman: Histochemical demonstration of esterases by production of indigo. Science114, 579–582 (1951).

    Google Scholar 

  • Braun-Falco, O.: Beitrag zum histochemischen Nachweis von Esterasen in normaler und psoriatischer Haut. Arch. klin. exp. Derm.202, 153–162 (1956).

    Google Scholar 

  • Burstone, M. S.: The cytochemical localization of esterase. J. nat. Cancer Inst.18, 167–172 (1957).

    Google Scholar 

  • Polyvinylacetat as a mounting medium for azo-dye procedures. J. Histochem. Cytochem.5, 196 (1957).

    Google Scholar 

  • Chessick, R. D.: Histochemical study of the distribution of esterases. J. Histochem. Cytochem.1, 471–485 (1953).

    Google Scholar 

  • The Histochemical specificity of cholinesterases. J. Histochem. Cytochem.2, 258–273 (1954).

    Google Scholar 

  • Coujard, R.: Bull. Histol. Techn. micr.20, 161 (1943). Zit. nachPearse 1953.

    Google Scholar 

  • Danielli, J. F.: Cytochemistry. A critical approach. New York: John Wiley & Sons 1953.

    Google Scholar 

  • Diemair, W., u.K. Boeckhoff: Künstliche Farbstoffe und Fermentreaktionen. Z. anal. Chem.139, 267–278 (1953).

    Google Scholar 

  • Eger, W., u.H. F. Geller: Zum Nachweis der alkalischen und sauren Phosphatase in der Leber am nativen Gefrierschnitt. Virchows Arch. path. Anat.322, 645–661 (1952).

    Google Scholar 

  • Friedman, O. M., andA. M. Seligman: Preparation of naphthyl acid phosphate. J. Amer. chem. Soc.72, 624–625 (1950).

    Google Scholar 

  • Goebel, A., u.H. Puchtler: Untersuchungen zur Methodik des histochemischen Nachweises der alkalischen Phosphatase. Zbl. Path.92, 159–171 (1954).

    Google Scholar 

  • Gössner, W.: Untersuchungen über das Verhalten der Phosphatasen und Esterasen während der Autolyse. Virchows Arch. path. Anat.327, 304–313 (1955).

    Google Scholar 

  • Histoenzymatische Untersuchungen zur Tuberkulose. Verh. dtsch. Ges. Path.39, 152–155 (1955).

    Google Scholar 

  • Gomori, G.: Microtechnical demonstration of phosphatase in tissue sections. Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.)42, 23–26 (1939).

    Google Scholar 

  • Histochemistry of esterases. International review of cytology. New York: Academic Press 1952.

    Google Scholar 

  • Microscopic Histochemistry. Chicago: University Chicago Press 1952.

    Google Scholar 

  • Human esterases. J. Lab. clin. Med.42, 445–453 (1953).

    Google Scholar 

  • Histochemistry of human esterases. J. Histochem. Cytochem.3, 479–484 (1955).

    Google Scholar 

  • Histochemical methods for acid phosphatase. J. Histochem. Cytochem.4, 453–461 (1956).

    Google Scholar 

  • Gomori, G., andR. D. Chessick: Histochemical studies of the inhibition of esterases. J. cell. comp. Physiol.41, 51–63 (1953).

    Google Scholar 

  • Gomori, G., andH. B. Coutinho: Selective inactivation of esterase by alcohol. Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.)83, 809–811 (1953).

    Google Scholar 

  • Grogg, E., andA. G. E. Pearse: The enzymic and lipid histochemistry of experimental tuberculosis. Brit. J. exp. Path.33, 567–575 (1952).

    Google Scholar 

  • Herrath, E. v.: Anatomische Bemerkungen zur Frage der Blutspeicherfunktion der Milz. Dtsch. med. Wschr.1935, 1924–1926.

  • Die Morphologie des retothelialen Systems. Verh. dtsch. Ges. Path.37, 13–25 (1954).

    Google Scholar 

  • Hoffmann-Ostenhof, O.: Enzymologie. Wien: Springer 1954.

    Google Scholar 

  • Holt, S. J.: A new principle for the histochemical localization of hydrolytic enzymes. Nature (Lond.)169, 271–273 (1952).

    Google Scholar 

  • A new approach to the cytochemical localization of enzymes. Proc. roy. Soc. B142, 160–169 (1954).

    Google Scholar 

  • The value of fundamental studies of staining reactions in enzyme histochemistry, with reference to indoxyl methods for esterases. J. Histochem. Cytochem.4, 541–554 (1956).

    Google Scholar 

  • Holt, S. J., andR. F. J. Withers: Cytochemical localization of esterases using indoxyl derivatives. Nature (Lond.)170, 1012–1014 (1952).

    Google Scholar 

  • Cytochemical localization of esterases using 5-bromoindoxyl acetate. J. Physiol. (Lond.)119, 36–38 (1953).

    Google Scholar 

  • Holzach, K.: Die aromatischen Diazoverbindungen. Sammlung chemischer und chemisch-technischer Vorträge. Neue Folge Heft 48. Stuttgart: Ferdinand Enke 1947.

    Google Scholar 

  • Hueck, W.: Die normale menschliche Milz als Blutbehälter. Verh. dtsch. Ges. Path.23, 6–38 (1928).

    Google Scholar 

  • Über das Mesenchym. Beitr. path. Anat.83, 152–184 (1930).

    Google Scholar 

  • Lison, L.: Histochimie et Cytochimie animale. Paris: Gauthier-Villars 1953.

    Google Scholar 

  • Malaty, H. A., u.G. H. Bourne: The histochemistry of simple esterase. Acta anat. (Basel)23, 337–350 (1955).

    Google Scholar 

  • Menten, M. L., J. Junge andM. H. Green: A coupling histochemical azo dye test for alkaline phosphatase in the kidney. J. biol. Chem.153, 471–477 (1944).

    Google Scholar 

  • Nachlas, M. M., D. T. Crawford andA. M. Seligman: The histochemical demonstration of leucine aminopeptidase. J. Histochem. Cytochem.5, 264–278 (1957).

    Google Scholar 

  • Nachlas, M. M., andA. M. Seligman: The comparative distribution of esterase in the tissues of five mammals by a histochemical technique. Anat. Rec.105, 677–695 (1949).

    Google Scholar 

  • Neumann, K. H.: Grundriß der Gefriertrocknung. Göttingen-Frankfurt-Berlin: Musterschmidt 1954.

    Google Scholar 

  • Novikoff, A. B., H. Beaufay andC. de Duve: Electron microscopy of lysosome-rich fractions from rat liver. J. biophys. biochem. Cytol.2, Suppl., 179–184 (1956).

    Google Scholar 

  • Novikoff, A. B., andS. J. Holt: Esterase-rich bodies in osmium-fixed cells of rat kidney and liver. J. biophys. biochem. Cytol.3, 127 (1957).

    Google Scholar 

  • Pearse, A. G. E.: Histochemistry, theoretical and applied. London: J. & A. Churchill 1953.

    Google Scholar 

  • The intracellular localization of esterases. J. Path. Bact.66, 331–333 (1953).

    Google Scholar 

  • Azo dye methods in enzyme histochemistry. International review of cytology, edit. byG. H. Bourne andJ. F. Danielli, p. 329–358. New York: Acad. Press 1954.

    Google Scholar 

  • The esterases of the hypophysis and their functional significance. J. Path. Bact.72, 471–487 (1956).

    Google Scholar 

  • Pearse, A. G. E., andW. J. Pepler: A probable peptidase in carcinoid tumors. Nature (Lond.)179, 589 (1957).

    Google Scholar 

  • Rath, H., u.E. Feess: Versuche zur Herstellung wasserlöslicher Naphthole für das Färben von Wolle. Melliand Textilber.35, 267–269 (1954).

    Google Scholar 

  • Ries, E.: Grundriß der Histophysiologie. Leipzig: Akademische Verlagsgesellschaft 1938.

    Google Scholar 

  • Rutenburg, A. M., R. B. Cohen andA. M. Seligman: Histochemical demonstration of aryl sulphatase. Science116, 539–543 (1952).

    Google Scholar 

  • Rutenburg, A. M., andA. M. Seligman: The histochemical demonstration of acid phosphatase by a post-incubation coupling technique. J. Histochem. Cytochem.3, 455–470 (1955).

    Google Scholar 

  • Schumacher, H. H.: Zur Topographie von Reduktionsorten im Leberläppchen. Verh. dtsch. Ges. Path.40, 254–260 (1956).

    Google Scholar 

  • Schweigger-Seidel, Fr.: Untersuchungen über die Milz. Virchows Arch. path. Anat.23, 526–570 (1862).

    Google Scholar 

  • Seidenfaden, W.: Künstliche organische Farbstoffe und ihre Anwendungen. Stuttgart: Ferdinand Enke 1957.

    Google Scholar 

  • Seligman, A. M., H. H. Chauncey andM. M. Nachlas: Effect of formalin fixation on the activity of five enzymes of rat liver. Stain Technol.26, 19–23 (1951).

    Google Scholar 

  • Seligman, A. M., M. M. Nachlas, L. H. Manheimer, O. M. Friedman andG. Wolf: Development of new methods for the histochemical demonstration of hydrolytic intracellular enzymes in a program of cancer research. Ann. Surg.130, 333–341 (1949).

    Google Scholar 

  • Spier, H. W., u.K. Martin: Histochemische Untersuchungen über die Phosphomonoesterasen der gesunden Haut mit Hinweis auf Befunde bei Hauterkrankungen. Arch. klin. exp. Derm.202, 120–152 (1956).

    Google Scholar 

  • Staemmler, M.: Die Bedeutung der Schweigger-Seidelschen Capillarhülsen der Milz. Virchows Arch. path. Anat.255, 585–598 (1925).

    Google Scholar 

  • Steigleder, G. K., u.H. Löffler: Zum histochemischen Nachweis unspezifischer Esterasen und Lipasen. Arch. klin. exp. Derm.203, 41–60 (1956).

    Google Scholar 

  • Wachstein, M.: Histochemical staining reactions of the normally functioning and abnormal kidney. J. Histochem. Cytochem.3, 246–270 (1955).

    Google Scholar 

Download references

Author information

Authors and Affiliations

  1. Aus dem Pathologischen Institut der Universität Tübingen, Germany

    Wolfgang Gössner

Authors
  1. Wolfgang Gössner
    View author publications

    You can also search for this author in PubMed Google Scholar

Additional information

Mit 38 Textabbildungen, davon 6 farbigen

Mit dankenswerter Unterstützung der Deutschen Forschungsgemeinschaft.

Habilitationsschrift, Medizinische Fakultät der Universität

Rights and permissions

Reprints and permissions

About this article

Cite this article

Gössner, W. Histochemischer Nachweis hydrolytischer Enzyme mit Hilfe der Azofarbstoffmethode. Histochemie 1, 48–96 (1958). https://doi.org/10.1007/BF00736627

Download citation

  • Received:

  • Issue Date:

  • DOI: https://doi.org/10.1007/BF00736627

Search

Navigation