ISSN:
1432-1955
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Biology
,
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Die während der Tiefgefrierkonservierung vonToxoplasma-gondii-Trophozoiten auftretenden Schädigungen wurden elektronenmikroskopisch untersucht. In Ringerlösung suspendierte Toxoplasmen (Stamm BK) aus dem Peritonealexsudat infizierter NMRI-Mäuse wurden unter Zusatz von 5% DMSO in flüssigem Stickstoff tiefgefroren und nach dem Auftauen mit nicht tiefgefrorenen Kontrollansätzen mit und ohne DMSO-Zusatz verglichen. Nur bei einigen der freiliegenden Toxoplasmen der DMSO-Kontrolle traten geringe Strukturveränderungen wie Erweiterung des endoplasmatischen Reticulums, Spaltbildung im Cytoplasma und Auflokkerung des Chromatins auf. Unter den tiefgefrorenen Parasiten erwiesen sich etwa 1/5 der freien Stadien morphologisch nicht oder nur leicht verändert. Dagegen zeigten die intrazellulären in Makrophagen liegenden Formen fast ausnahmslos massive Schädigungen. Die auffälligste Veränderung war eine partielle Zerstörung des inneren Zellmembran-Komplexes. Als Folge dieser häufig beobachteten Schädigung wurde ein Ausströmen des ribosomenhaltigen Grundplasmas unter ballonartiger Aufblähung der äußeren Elementarmembran beobachtet. Der Austritt von Grundplasma führte zu einer drastischen Abnahme der Elektronendichte des gesamten Cytoplasmas. Andere charakteristische Degenerationserscheinungen waren Vakuolisierung des Cytoplasmas bis zur Entstehung großer optisch leerer Räume, Erweiterung des perinucleären Raumes, Schwellung der Mitochondrien, Auflösung der Rhoptrien, Mikronemata und der Golgi-Zone, grobschollige Auflockerung und Umverteilung elektronendichter Kernanteile bis zur Auflösung unter Erhaltung des Karyoplasmas. In einigen fast völlig eluierten Trophozoiten wurden vergrößerte, aber auffällig elektronendichte Mitochondrien beobachtet. Neben der Zellmembran erwies sich das Conoid als das am längsten persistierende Organell. Anhand der nach der Tiefgefrierung festgestellten Alterationen kann gefolgert werden, daß die nur gering oder nicht geschädigten freien Zellen infektiös blieben.
Notes:
Summary The changes observed in trophozoites ofToxoplasma gondii after deep-freeze preservation were examined by electron microscopy. Toxoplasmas (strain BK) from peritoneal exudate of infected NMRI mice were suspended in Ringer's solution, deep-frozen in liquid nitrogen with 5% dimethylsulphoxide (DMSO), and compared after thawing with control samples with an without the addition of DMSO. Slight structural changes such as widening of endoplasmic reticulum, formation of fissures in the cytoplasm, and loosening of chromatin were only observed in some of the free toxoplasmas of the DMSO control. Among the deep-frozen parasites, about 1/5 of the free stages showed no or only slight morphological changes. In contrast to this, almost all intracellular forms found in macrophages showed lesions. The most remarkable change was a partial destruction of the inner cell membrane complex. The outflow of ribosome-containing protoplasm with ballon-like swelling of the outer elementary membrane was observed as a consequence of this frequent lesion. The outflow of protoplasm induced a drastic decrease in the electronic density of the whole cytoplasm. Other characteristic degenerative signs were vacuolation of cytoplasm up to formation of great optically empty spaces, widening of the perinuclear space, swelling of mitochondria, disintegration of rhoptria, micronemata, and Golgi zone, coarse-plaque loosening, and displacement of electron-dense areas of the nucleus up to disintegration with maintenance of the karyoplasm. In some almost completely disintegrated trophozoites, enlarged mitochondria with remarkable electronic density were observed. Apart from the cell membrane, the conoid was the longest-persisting organelle. The alterations observed after deep-freezing permit the conclusion that the free cells, which were only slightly impaired or not at all, remained infective.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00933929
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