ISSN:
1871-4528
Keywords:
monohaploid potato
;
Solanum
;
protoplast fusion
;
protoplast separation
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Agriculture, Forestry, Horticulture, Fishery, Domestic Science, Nutrition
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Es wurde die isoelektrische Fokussierung als mögliche neue Technik zur routinemässigen Isolierung hybrider Fusionsprodukte aus Kartoffel-Protoplasten untersucht. Die gleiche Technik wurde ebenfalls für die Isolierung von Monohaploiden (x) aus einer Population Monohaploider (x) und getrennt verdoppelter (2x) Protoplasten geprüft. Wenn Forschung auf monohaploide Protoplasten konzentriert wird, ist eine derartige Separierung notwendig, da höhere Ploidiestufen bereits im Ausgangsmaterial von Blätterm gefunden werden können. Bei Verwendung eines Apparates wie in Abb. 1 gezeigt werden keine klaren Unterschiede im isoelektrischen Punkt (pl) zwischen Kartoffellinien und den KontrollspeziesLycopersicon peruvianum undNicotiana plumbaginifolia gefunden. Nur kleine Unterschiede (0,05 pH-Einheiten) fanden sich zwischenx- und 2x-Protoplasten (Tabelle 1). Die pI-Werte wurden von jedem Elektrophorese-Puffer beeinflusst (Tabelle 2). Experimente über die Lebensfähigkeit der Protoplasten zeigten, dass sowohl die Wahl des Puffers als auch seine Ionenstärke die Lebensfähigkeit der Protoplasten stark beeinflussen konnten (Abb. 2 und 3). Bei Verwendung von pH-abgestuften Puffersystemen (Tabelle 4) erwiesen sich die Unterschiede im Membranpotential der Protoplasten des Solanaceen-Materials als zu klein für eine Separierung durch isoelektrische Fokussierung.
Abstract:
Résumé La convergence isoélectrique a été étudiée comme une nouvelle technique potentielle pour l'isolement de routine des produits de fusion des protoplastes issus d'hybrides de pomme de terre. Cette technique a également été testée pour isoler des protoplastes monohaploïdes (x) dans une population de protoplastes monohaploïdes-protoplastes à chromosomes doublés (2x). Si la recherche est basée sur les protoplastes monohaploïdes et nécessite une séparation à partir d'un plus haut niveau de ploïdie, on peut déjà trouver du matériel dans les feuilles. En utilisant l'appareil présenté dans la figure 1, des différences peu évidentes ont été trouvées en ce qui concerne le point isoélectrique (pI) entre les lignées testées ou entre les lignées et les deux espèces-témoinsLycopersicon peruvianum etNicotiana plumbaginifolia. De faibles différences seulement (0,05 unités pH) sont apparues entre les protoplastesx et 2x (tableau 1). La valeur du point isoélectrique étant influencée par le pH du tampon utilisé (tableau 2). Les expériences sur la viabilité des protoplastes montraient que le choix du tampon et de sa force ionique pouvait grandement influencer celles-ci (figures 2 et 3). En employant des systèmes de tampons à gradients de pH, comme il est fait mention dans la figure 4, les différences dans le potentiel de la membrane des protoplastes des Solanacées étaient trop faibles pour permettre la séparation par la convergence isoélectrique.
Notes:
Summary An isoelectric focusing technique was investigated as a potential tool for isolating hybrid fusion products of potato (Solanum tuberosum L.) after protoplast fusion and for isolating monohaploid protoplasts (2n=x=12) from a population of monohaploid (x) and doubled (2x) protoplasts. No differences in isoelectric points (pI) were detected between either the potato lines tested or between the potato lines and the two control speciesLycopersicon peruvianum (L.) Mill. andNicotiana plumbaginifolia Viv. Differences of only 0.05 pH unit were found betweenx and 2x potato protoplasts. The pI value was influenced by each electrophoresis buffer but with the pH-gradient buffer systems used, the differences in membrane potential of the protoplasts tested were too small for separation by isoelectric focusing.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF02367638
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