ISSN:
1432-1203
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Biology
,
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Es wird eine Technik beschrieben, die folgende Schritte enthält: 1.Differentielle Denaturierung von DNA an den Chromosomenarmen mit Na-Hydroxid, das Formalin enthält (NaOH-F). 2. Färbung mit Acridin-Orange. Die NaOH-F-Technik ergibt Chromosomen mit rot, gelb, braun und grün gefärbten Banden, die bei Schwarzweißphotographie als negative Q-Banden erscheinen. Das wird durch Densitometrie bestätigt — mit Ausnahme einiger Zentromerregionen und der Sekundärkonstruktionen auf den Chromosomen 1, 9, 16. Untersuchungen an gealterten Präparaten zeigen, daß spontane Denaturierung bei Zimmertemperatur auftritt. Präparate, die 2–3 Wochen bei Zimmertemperatur aufbewahrt wurden, geben mit der NaOH-F/AO-Technik optimale Resultate. Trypsin-Vorbehandlung beeinflußt das Bandmuster nicht. Die NaOH-F/AO-Technik hat die folgenden Vorteile: 1. Sie färbt die Chromosomenenden klarer als Quinacrin; die Nüzlichkeit dieser Eigenschaft wird durch densitometrische Bestimmungen verschiedener Chromosomen-Rearrangements bewiesen. 2. Sie kann zusammen mit anderen Bandentechniken an der gleichen Zelle verwertet werden; so umgeht man Schwierigkeiten, die bei Vergleich von Ergebnissen an verschiedenen Zelltypen auftreten.
Notes:
Summary A technique is described in detail for 1. differentially denaturing DNA along chromosome arms with sodium hydroxide containing formalin (NaOH-F) and 2. staining with acridine orange (AO). The NaOH-F/AO technique results in chromosomes with red, yellow, brown and green colored bands which, when photographed in black and white, appear to be the reverse of Q bands. Densitometry tracings of these patterns confirm them to be the reverse of Q bands with the exception of some centromeric regions and the secondary constrictions on chromosomes 1, 9 and 16. Studies on the age of slides indicate that spontaneous denaturation occurs at room temperature. Slides aged 2–3 weeks at room temperature give optimal results with the NaOH-F/AO technique. Trypsin treatment prior to NaOH-F/AO does not affect the resultant banding pattern. The NaOH-F/AO technique is useful because 1. it tends to stain the ends of chromosomes more clearly than does quinacrine — the utility of this feature is demonstrated by densitometry tracings of various chromosome rearrangements and 2. it can be used in sequence with other chromosome banding techniques on the same cell and so circumvents problems in the comparison of results obtained with different cells.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00282209
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