ISSN:
1432-119X
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Biology
,
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Die Wirkung verschiedener Gewebe-Fixierungsmittel auf Humanalbumin und die Proteine des Seretins® (menschliche Serumkonserve) wurde papierelektrophoretisch untersucht. A. Humanalbumin. 1. In nur wenigen Fällen kommt es als Primärwirkung der Fixierungslösungen zu einer Präzipitatbildung. Für alle untersuchten Fixierungsmittel gilt, daß der größere Teil des eingesetzten Humanalbumins nach kurzem Einwirken der Fixierungslösungen als natives Eiweiß wiedergefunden wird. Nur geringe Anteile des Humanalbumins werden in wenigen Fällen durch das betreffende Fixierungsmittel denaturiert. 2. Fünfstündige Einwirkungsdauer von 5% TCE in 6% igem Formol auf das Humanalbumin hat keine verstärkte Wirkung zur Folge. 3. Die Wirkung von 6% igem Glutardialdehyd auf das Humanalbumin ist streng zeitabhängig. Bereits 10 min nach Zugabe des Glutardialdehyds zum Humanalbumin enthält die Lösung kein natives Eiweiß mehr. B. Seretin ® . 1. Nach ihrer Wirkung auf das Seretin® lassen sich die untersuchten Fixierungsmittel in drei Gruppen gliedern: a) Fixierungsmittel mit sehr geringer Wirkung. Die Eiweiße des Seretins® werden durch diese Fixierungsmittel nicht oder kaum vermindert. Nur geringe Eiweißmengen werden denaturiert. Diese Fixierungsmittel wirken auch bei fortschreitender Einwirkungszeit nicht stärker. Zu der Gruppe gehören: Methanol 96%, Osmiumtetroxyd 2% und Formol 10%. b) Fixierungsmittel mit geringer bis stärkerer Wirkung. Meist kommt es nach Zusatz dieser Mittel zur Präzipitatbildung. Teilweise enthalten die Niederschläge aber noch beträchtliche Mengen nativen Eiweißes. Natives Protein wird in jedem Fall gefunden. Denaturiertes Eiweiß liegt in mittleren bis größeren Mengen vor. Die Wirkung dieser Fixierungsmittel ist nur wenig zeitabhängig. Geordnet nach steigender Wirksamkeit handelt es sich um folgende Mittel: TCE 10%, Äthanol 96%, 0,5% TCE in 6% igem Formol, Gemisch nach Carnoy, Perchlorsäure 2%, Gemisch nach Bouin und 5% TCE in 6% igem Formol, c) Stark wirkende Fixierungsmittel. Stets Präzipitat-oder Gelbildung. Weder die Überstände noch die Niederschläge enthalten nach dreistündiger Versuchsdauer noch natives Eiweiß. Die Proteine sind quantitativ denaturiert. Die Wirkung dieser Mittel verstärkt sich mit fortschreitender Einwirkungsdauer. Es handelt sich um die Lösung Susa nach Heidenhain und das Gemisch nach Stieve sowie um Glutardialdehyd 2% und 6%. — 2. Bei der Einwirkung von 0,5% TCE in 6% igem Formol auf das Seretin® konnte zwischen 0 und 37° C keine Temperaturabhängigkeit der Wirkung gefunden werden. — 3. 5% TCE in 6% igem Formol wirkt mit steigender Temperatur zunehmend stärker denaturierend auf die Seretineiweiße ein. Während bei einer Versuchstemperatur von 0° C nach 3 Std noch größere Mengen nativen Eiweißes wiedergefunden wurden, enthielt die Lösung bei einer Versuchstemperatur von 37° C nach dieser Zeit nur noch denaturiertes Eiweiß. Es scheint hier aber auch schon zu einer Eiweißhydrolyse zu kommen.
Notes:
Summary The influence of various tissue fixatives on human albumin and the proteins of Seretin® (bottled human serum) is tested by means of electrophoresis. A. Human Albumin. 1. Only in a few cases the formation of a precipitate is the first reaction to a treatment with fixatives. All fixatives tested show, that if the treatment lasts for only a short period, the major part of the human albumin treated with fixative is recovered as native protein. In a few cases a small quantity of the human albumin is denatured by the respective fixative. — 2. Treating human albumin with 5% trichloracetic acid (TCE) in 6% formalin for 5 hours shows no increased effect. — 3. The action of 6% glutardialdehyde on human albumin is strictly time-dependent. 10 minutes after glutardialdehyde is added to human albumin no native protein is demonstrable in the solution. B. Seretin ® . 1. According to their action on Seretin the fixatives in question can be divided in three groups: a) Fixatives which have very little effect. The proteins of Seretin® are little or not at all affected by the action of the fixative. Only very small quantities of protein are denatured. The effect of these fixatives does not increase with increasing time. The group includes: Methanol 96%, osmiumtetroxyd 2%, and formalin 10%. b) Fixatives with slight to stronger effects. In most cases a precipitate will form after the fixative has been added to the protein solution. Some of the precipitates, however, contain considerable amounts of native protein. Native protein is demonstrable in any case. Denatured protein is demonstrable in medium to large amounts. The effect of these fixatives is hardly influenced by time. In order of increasing effect the fixatives in question are: TCE 10%, ethanol 96%, 0,5% TCE in 6% formalin, Carnoy's solution, perchloric acid 2%, Bouin's solution, and 5% TCE in 6 % formalin. c) Fixatives with strong effects. They regularly induce the formation of either a precipitate or a gel. After three hours neither supernates nor precipitates contain any native protein. The proteins are qualitatively denatured. The effect of the fixatives increases with the time of treatment. The fixatives in question are: Susa solution (Heidenhain), Stieve's solution, glutardialdehyde 2% and 6%. — 2. Temperatures between 0° C and 37° C have no influence on the effect of 0,5 % TCE in 6% formalin on Seretin. — 3. With rising temperatures 5% TCE in 6% formalin has an increasing denaturing effect on the proteins of Seretin®. While larger quantities of native protein are found after 3 hours a t0° C, only denatured proteins are demonstrable after the same period of time at 37°. It seems, however, that in this case too a protein hydrolysis takes place.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00306467
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