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    Springer
    Calcified tissue international 3 (1969), S. 55-66 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Bones ; Bone marrow ; Enzymes ; Phosphatases ; Hydrolases
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les activités de différentes encymes du fémur et de la tibia du rat étaient étudiées. Pour mesurer acide et alkaline phosphatase, lactatdehydrogenase, activité protéolytique, leucinaminopéptidase, glycylglycindipéptidase, glutamatdehydrogenase, aspartate transaminase et alanintransaminase, une méthode quantitative était developpé. Quelques réactions characteristiques étaient examinées das n des homogénates de la métaphyse. La distribution des encymes dans la métaphyse, diaphyse et dans la moelee osseuse était étudié. L'activité la plus grande per mg DNA était observé dans la métaphyse, celle la plus basse dans la moelle osseuse. En générale les activités étaient 40–70% abaissées dans la diaphyse comparé avec la métaphyse. L'activité encymatique de la métaphyse n'était pas différente l'une de l'autre chez les rats agés de 29 et 49 jours mais elle diminuait chez celles de 82 jours. L'activité protéolytique a pH 8 ne correspondait pas avec les autres encymes: elle était plus haut dans la moelle osseuse que dans l'os et augmentait visiblement avec l'age.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Verschiedene Enzymaktivitäten in Femur und Tibia der Ratte wurden untersucht. Es wurden quantitative Prüfmethoden für die Bestimmung von saurer und alkalischer Phosphatase, Lactatdehydrogenase, proteolytischer Aktivität, Leucinaminopeptidase, Glycylglycin-Dipeptidase, Glutamatdehydrogenase, Aspartat-Transaminase und Alanin-Transaminase entwickelt. Einige Eigenschaften dieser Enzyme wurden in Metaphysenhomogenaten untersucht. Die Verteilung der Enzymaktiväten in Metaphyse, Diaphyse und Knochenmark wurde bestimmt. Die Aktivität pro mg DNA war am höchsten in der Metaphyse, am niedrigsten im Knochenmark. Allgemein waren die Aktivitäten 40–70% tiefer in der Diaphyse als in der Metaphyse. Die metaphysäre enzymatische Aktivität war dieselbe bei 29 und 49 Tage alten Ratten, hingegen tiefer bei 82 Tage alten Ratten. Die proteolytische Aktivität bei pH 8 war von anderen untersuchten Aktivitäten verschieden; sic war höher im Knochenmark als im Knochen und zeigte deutliche Zunahme mit dem Alter.
    Notizen: Abstract A study was made of several enzymatic activities in rat femur and tibia. Quantitative assays were developed for the determination of acid and alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase, proteolytic activity, leucine aminopeptidase, glycylglycine dipeptidase, glutamate dehydrogenase, aspartate transaminase, and alanine transaminase. Some properties of these enzymes were studied using metaphyseal homogenates. The distribution of activity in the metaphysis, diaphysis, and marrow was determined. The activity per mg of DNA was highest in the metaphysis and lowest in marrow. The activities in general were 40–70% lower in the diaphysis than in the metaphysis. Metaphyseal enzymatic activity was the same in 29- and 49-day-old rats but lower in 82-day-old rats. Proteolytic activity at pH 8.0 differed from the other activities studied being higher in marrow than in bone and increasing markedly with age.
    Materialart: Digitale Medien
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    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Hydrochlorothiazide ; Cell Proliferation ; Platelet-derived growth factor ; Mitogen ; Osteoblasts (human)
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Notizen: Abstract Long-term use of hydrochlorothizide (HCTZ), a common diuretic agent for hypertension, has been associated with increased bone density and reduced hip fracture rates in patients. In this study, we sought to examine whether HCTZ has an anabolic effect on the proliferation of human osteoblasts (derived from either vertebrate or rib bone samples) in vitro. Cell proliferation was determined by [3H]thymidine incorporation and cell number counting. In medium supplemented with 1% bovine calf serum, HCTZ significantly and reproducibly increased [3H]thymidine incorporation and cell number. The stimulatory effect was dose dependent in a biphasic manner, with the maximal stimulation (approximately 60% above control, P〈0.001) seen at 1 μM HCTZ. In fresh serum-free medium, HCTZ was ineffective as a bone cell mitogen, indicating that the bone cell mitogenic activity of HCTZ required a serum growth factor (GF). HCTZ at doses greater than 10 μM was inhibitory in the presence or the absence of serum, presumably because of the cytotoxic effects. The serum requirement for the bone cell mitogenic activity of HCTZ could be replaced with a conditioned medium (conditioned with normal human osteoblasts for 24 hours), or with a mitogenic dose (1 ng/ml) of PDGF. The GF requirement was specific for PDGF, because other bone cell-derived growth factors (i.e., TGFβ, IGF-I, IGF-II, and bFGF) were unable to replace serum for the bone cell mitogenic activity of HCTZ. In summary, this study shows that (1) HCTZ stimulated the proliferation of normal, untrasformed, human osteoblasts in vitro; (2) the bone cell mitogenic effect of HCTZ required the presence of a serum GF; (3) the serum requirement could be replaced with a bone cell GF in conditioned medium; (4) the GF requirement was specific for PDGF. In conclusion, we have demonstrated for the first time that HCTZ has a direct anabolic effect on human osteoblasts in vitro, and that the mitogenic activity is dependent on the presence of PDGF. Because increased bone cell proliferation is a key determinant of bone formation, these observations raise the interesting possibility that HCTZ could act directly on bone cells to stimulate bone formation in patients.
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