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  • 1
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    Springer
    Calcified tissue international 10 (1972), S. 49-57 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Histochemistry ; Cartilage ; Enzymes ; Vitamin D ; Starvation
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé 1. La distribution quantitative de phosphatase alcaline et de déshydrogénas eglucose-6-phosphate dans les zones hypertrophiques, en voie de prolifération du cartilage de rats rachitiques, pendant la cicatrisation induite par l'administration de vitamin D ou par jeun prolongé, est étudiée. 2. L'activité en phosphatase alcaline de la zone hypertrophique est environ triple de celle de la zone de prolifération du rat sevré normal et environ quadruple de celle des rats rachitiques. 3. Apres administration d'une seule dose de vitamine D (8000 unités), il se produit une augmentation significative de l'activité en phosphatase alcaline de la a zone en voie de prolifération. Une augmentation moins nette est observée dans la zone de prolifération de rats ayant jeuné 48 heures. 4. On observe une diminution significative de l'activité en phosphatase alcaline de la partie centrale de la zone hypertrophique de cartilage aprés traitement a la vitamine D. Une telle diminution n'a pas été observée chez le rat qui jeûne. 5. Chez le rat sevré normal, l'activité en déshydrogénase glucose-6-phosphate (G-6-PDH) est plus élevée dans la zone de prolifération que dans la zone hypertrophique. Chez le rat rachitique non traité, le contenu en enzyme est à peu pres identique dans les deux zones. 6. Apres traitement a la vitamine D, on note une décroissance nette de l'activité en G-6-PDH. Une telle décroissance n'est pas observée chez le rat qui jeûne.
    Kurzfassung: Zusammenfassung 1. Diese Arbeit beschreibt die quantitative Verteilung der alkalischen Phosphatase und der Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase in proliferierenden und hypertrophischen Zonen von rachitischem Rattenknorpel während der durch Vitamin D-Gabe hervorgerufenen Heilung oder während der Mangeldiät. 2. Die Aktivität der alkalischen Phosphatase in der hypertrophischen Zone war etwa dreimal so groß wie in der proliferierende Zone der normalen entwöhnten Ratte und etwa viermal so groß bei den rachitischen Ratten. 3. Nach einer einmaligen Vitamin D-Gabe (8000 i.E) erfolgte eine signifikante Erhöhung der alkalischen Phosphatasen-Aktivität in der proliferierenden Zone. Eine weniger signifikante Erhöhung wurde in der proliferierenden Zone von Ratten festgestellt, welche 48 Std gefastet hatten. 4. Nach Vitamin D-Behandlung erfolgte eine signifikante Abnahme der alkalischen Phosphatasen-Aktivität in der mittleren Region der hypertrophischen Zone des Knorpels. Bei den fastenden Ratten wurde keine solche Abnahme beobachtet. 5. Bei der normalen entwöhnten Ratte war die Aktivität der Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G-6-PDH) größer in der proliferierenden als in der hypertrophischen Zone. Bei der unbehandelten rachitischen Ratte war der Enzymgehalt in beiden Zonen etwa gleich. 6. Nach Vitamin D-Behandlung erfolgte eine merkliche Abnahme der G-6-PDH-Aktivität. Bei der fastenden Ratte wurde keine solche Abnahme beobachtet.
    Notizen: Abstract 1. The quantitative distribution of alkaline phosphatase and glucose-6-phosphate dehydrogenase in proliferating and hypertrophic zones of rachitic rat cartilage during healing induced by vitamin D administration or starvation is presented. 2. Alkaline phosphatase activity in the hypertrophic zone is about three times greater than that of the proliferating zone of the normal weanling rat and approximately four times greater in the rachitic rats. 3. Following a single dose of vitamin D (8000 I. U.) there was a significant elevation in alkaline phosphatase activity of the proliferating zone. A less significant increase was observed in the proliferating zone of rats which had breen fasted 48 hours. 4. There was a significant decrease in the alkaline phosphatase activity of the central region of hypertrophic zone of cartilage after vitamin D treatment. No such decrease was observed in the fasted rats. 5. In the normal weanling rat glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6-PDH) activity was greater in the proliferating zone as compared to the hypertrophic zone. In the untreated rachitic rat the enzyme content was about the same in the two zones. 6. Following vitamin D treatment there was an appreciable decrease in the G-6-PDH activity. No such decrease was observed in the fasted rat.
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  • 2
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    Springer
    Calcified tissue international 10 (1972), S. 223-237 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Ageing ; Cartilage ; Glycosaminoglycans ; Osteoarthritis
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les glycosaminoglycanes du cartilage articulaire des condyles fémoraux de 119 cas d'autopsies humaines ont été isolés et caractérisés par le chlorure de cetylpyridinium. En utilisant la même méthode de colonne, avec micro-échelle, les glycosaminoglycanes sont estimés quantitativement dans le cartilage articulaire normal, de la naissance à l'âge de 95 ans, ainsi que dans des cartilages ostéo-arthritiques. Dans le cartilage normal, le chondroitine sulfate se rencontre sous la forme de chondroitine-4-sulfate et chondroitine-6-sulfate, dont le rapport décroit avec l'âge. Le chondroitine sulfate a un rapport sulfate/acide hexuronique en dessous de l'unité pour les moins de vingt ans et supérieur à l'unité dans les groupes d'âges plus élevés. Deux types de kératane sulfate et d'acide hyaluronique sont isolés dans tous les groupes. Les glycosaminoglycanes de cartilage ostéoarthritique ne montrent pas de différence avec le cartilage normal pour la quantité ou le rapport des isomères. Dans le cartilage normal, on note une décroissance significative des hexosamines totales de la naissance à l'âge de 11–20 par suite de la réduction de chondroitine sulfate. Chez l'adulte, un rapport en voie d'augmentation du kératosulfate plus la fraction glycoprotéique du chondroitine sulfate est observé. Le cartilage ostéo-arthritique montre une réduction de toutes les fractions glycosaminoglycanes sans changement de distribution. Le cartilage normal d'articulations ostéo-arthritiques est inchangé. Des courbes de solubilité indiquent une décroissance en P.M. du chondroitine sulfate dans le cartilage normal de la naissance à 21–30 ans, et une tendance vers des P.M. moins élevés dans le cartilage ostéoarthritique.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Die Glycosaminoglycane im Gelenkknorpel der femoralen Condylen von 119 menschlichen Autopsien wurden isoliert. Nachträglich wurden sie mit Hilfe von Cetylpyridinchlorid charakterisiert. Unter Verwendung derselben Säulentechnik als Mikromethode wurden die Glycosaminoglycane quantitativ im Gelenkknorpel von Gesunden von der Geburt bis zum 95. Altersjahr sowie in osteoarthritischem Knorpel gemessen. Im normalen Knorpel trat Chondroitinsulfat als Chondroitin-4-Sulfat und Chondroitin-6-Sulfat auf und das Verhältnis dieser beiden Substanzen nahm mit zunehmendem Alter ab. Unter dem 20. Altersjahr hatte das Chondroitinsulfat ein Sulfat/Hexuronsäure-Verhältnis kleiner als 1, in höheren Altersgruppen größer als 1. Zwei Typen von Keratansulfat und Hyaluronsäure wurden in allen Altersgruppen isoliert. Die Glycosaminoglycane von osteoarthritischem Knorpel zeigten keine Unterschiede zu denjenigen des normalen Knorpels in bezug auf Menge oder Verhältnis der Isomere. Im normalen Knorpel zeigte sich eine signifikante Abnahme der totalen Hexosamine von der Geburt bis zum 11–20. Altersjahr, welche auf eine Verminderung von Chondroitinsulfat zurückzuführen ist. Bei Erwachsenen wurde ein zunehmendes Verhältnis der Keratansulfat + Glycoproteinfraktion von Chondroitinsulfat beobachtet. Osteoarthritischer Knorpel zeigte einen Rückgang aller Glycosaminoglycanfraktionen ohne Änderung der Verteilung. Normaler Knorpel aus osteoarthritischen Gelenken war unverändert. Löslichkeitsprofile deuteten auf vermindertes Molekulargewicht von Chondroitinsulfat in normalem Knorpel von der Geburt bis zum 21.–30. Altersjahr und auf eine Tendenz zu niedrigerem Molekulargewicht in osteoarthritischem Knorpel.
    Notizen: Abstract The glycosaminoglycans in articular cartilage from the femoral condyles of 119 human autopsy cases have been isolated and subsequently characterized using cetylpyridinium chloride. Using the same column method in microscale the glycosaminoglycans were estimated quantitatively in normal articular cartilage from birth to 95 years of age and in osteoarthritic cartilage. In normal cartilage chondroitinsulphate occurred as chondroitin-4-sulphate and chondroitin-6-sulphate, decreasing in ratio with age. The chondroitinsulphate had a sulphate/hexuronic acid ratio below unity, below 20 years, above unity in the higher age groups. Two types of keratansulphate and hyaluronic acid were isolated. The glycosaminoglycans isolated from osteoarthritic cartilage showed no differences from normal cartilage as to the amount of their moities of chondroitin sulphate isomers. In normal cartilage there was a significant decrease of total hexosamines from birth to 11–20 years, due to a reduction of chondroitinsulphate. In adults, an increasing ratio of the keratansulphate plus glycoprotein fraction to chondroitinsulphate was observed. Osteoarthritic cartilage showed a significant reduction of all glycosaminoglycan fractions without change of distribution. Normal cartilage taken from osteoarthritic joints was unaltered. Solubility profiles indicated decreases in molecular weight of chondroitin sulphate in normal cartilage from birth to 21–30 years, and a trend towards lower molecular weight in osteoarthritic cartilage.
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  • 3
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    Springer
    Calcified tissue international 12 (1973), S. 16-29 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Bone ; Cartilage ; Culture ; Glycosaminoglycans ; Sephadex ; Collagen ; Electron Microscopy
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Des cultures de monocouches cellulaires d'épiphyses fémorales distales d'embryons de veaux sont étudiées immédiatement après la première sub-culture, réalisée après culture primaire. L'examen au microscope optique classique montre des dépôts disséminés de matériel métachromatique: en microscopie électronique, de fines fibrilles, considérées comme des fibres de collagène, en voie de développement, ont été observées. La nature des sécrétions cellulaires a été étudiée à l'aide de précurseurs radioactifs, fractionnés sur Sephadex G200, ainsi qu'à l'aide de chromatographie par échange d'ions. La digestion enzymatique par hyaluronidase et chondroitinase AC et ABC, bactérienne et testiculaire, démontre que les cellules synthétisent 70% de glycosaminoglycanes sulfatés et 30% de glycosaminoglycanes non sulfatés. Parmi les glycosaminoglycanes, 70% sont constitués par du chondroitine-4-sulfate, 20% par du chondroitine-6-sulfate et le reste probablement par du keratane-sulfate. Les études avec des acides aminés marqués indiquent que les cellules synthétisent une protéine de poids moléculaire élevé, contenant de l'hydroxyleproline, ainsi qu'une protéine non-collagénique, mise en évidence par incorporation de tryptophane.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Einschichtige Zellkulturen von der distalen Femurepiphyse von Kalbsembryonen wurden nach der ersten Subkultur untersucht, welche nach der Verschmelzung der primären Kulturen angesetzt wurde. Die lichtmikroskopische Untersuchung zeigte verstreute Ablagerungen von metachromatisch gefärbtem Material; bei der Elektronenmikroskopie wurden feine Fibrillen festgestellt, welche als Collagenvorstufe angesehen wurden. Nach einer Kultur von mehreren Tagen zeigte sich eine lacunäre Anordnung der Zellen. Die Beschaffenheit der Zellsekretionen wurde mittels radioaktiv markierten Verbindungen untersucht, welche auf Sephadex G200 und durch Ionenaustausch-Chromatographie fraktioniert wurden. Die enzymatische Verdauung mit bakterieller und testikulärer Hyaluronidase und Chondroitinase-AC und-ABC zeigte, daß die Zellen 70% sulfatierte und 30% nichtsulfatierte Glycosaminoglycane synthetisierten. Die sulfatierten Glycosaminoglycane enthielten 70% Chondroitin-4-Sulfat, 20% Chondroitin-6-Sulfat, und der Rest war wahrscheinlich Keratansulfat. Untersuchungen mit markierten Aminosäuren-Vorläufern deuteten darauf hin, daß die Zellen ein Hydroxyprolinhaltiges, hochmolekuläres Protein synthetisierten und dazu etwas Eiweiß, bei dem es sich auf Grund des Tryptophaneinbaues nicht um Collagen handeln kann.
    Notizen: Abstract Monolayer cell cultures from the distal femoral epiphyses of embryo calves were studied following the first subculture, which was carried out after confluence in primary culture. Light microscopic examination revealed scattered deposits of metachromatic-staining material; on electron microscopy fine fibrils considered to be developmental collagen were seen. After several days in culture lacuna-like patterns of cells were seen. The nature of the cell secretions were studied by radioactive precursors, which were fractionated on Sephadex G200 and by ion exchange chromatography. Enzyme digestion with bacterial and testicular hyaluronidase and chondroitinase-AC and-ABC revealed that the cells synthesized 70% sulphated, and 30% non-sulphated glycosaminoglycans. Of the sulphated glycosaminoglycans 70% was chondroitin-4-sulphate, 20% chondroitin-6-sulphate, and the remainder probably keratansulphate. Studies were labelled amino acid precursors suggested that the cells synthesized a high-molecular weight protein containing hydroxyproline, as well as some non-collagenous protein, shown by tryptophan incorporation
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  • 4
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Cartilage ; Mineralization ; Histochemistry ; Matrix vesicles
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les expériences portent sur la minéralisation de la plaque épiphysaire tibiale du rat de souche Long-Evans, étudiée après traitement à la cortisone, propylthiouracile ou après jeûn prolongé. Dans des conditions normales, le calcium et le phosphate augmentent au niveau de la matrice extracellulaire, alors que les mucopolysaccharides sulfonés diminuent. Par contre, les vésicules de la matrice au niveau desquels se forment les cristaux d'hydroxyapatite, augmentent. Dans les rats ayant subi un traitement à la propylthiouracile, les cristaux d'hydroxyapatite sont très apparents. Ceci est du à une augmentation du dépôt en calcium, et à une diminution des granules des mitochondries qui contiennent probablement du calcium et du phosphate. En outre, une augmentation du nombre des vésicules de la matrice est visible ainsi qu'une décroissance de la quantité des mucopolysaccharides sulfonés. Dans les rats traités à la cortisone, les cristaux d'hydroxyapatite sont présents, mais dans une quantité moindre que dans les rats ayant subi l'effet du propylthiouracile. Le dépôt en calcium est légèrement réduit; les granules des mitochondries sont plus nombreuses que dans les groupes précédents, le nombre des vesicules de la matrice est plus faible, et les mucopolysaccharides sulfonés sont plus apparents que dans les rats traités à la propylthiouracile. Dans les rats ayant subi l'effet du jeûn, les cristaux d'hydroxyapatite sont fortement réduits ou entièrement absents. Ceci est du à une réduction de dépôt du calcium, une augmentation du nombre des granules des mitochondries (ce qui semble indiquer que les phénomènes de transport vers la matrice extracellulaire sont ralentis), alors que les vésicules de la matrice sont présentes dans des quantités réduites. Les mucopolysaccharides sont plus apparents que dans les animaux traités à la cortisone ou à la propylthiouracile.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Die Untersuchung beruht auf einem Vergleich der Mineralisation in der hypertrophischen Zone in der Epiphysealplatte von Long Evans Ratten die mit Kortison, Propylthiourazil oder einfachem Fasten behandelt wurden. Unter Normalbedingungen lassen sich in der extrazellulären Matrix der Calcifikationszone die folgenden Veränderungen beobachten: der Gehalt an Calcium und Phosphat nimmt zu, derjenige an Mukopolysacchariden nimmt ab, während die Matrixvesiclen, in denen sich die Bildung des Hydroxylapatits vollzieht, zunehmen. In Ratten die mit Propylthiourazil behandelt wurden, treten die Hydroxylapatitskristalle besonders hervor. Dies hängt mit einer Zunahme der Calciumablagerung zusamen sowie einer Abnahme der Mitochondriengranulation (in denen vermutlich Calcium und Phosphat enthalten sind). Ferner hängt damit zusammen eine numerische Zunahme der Matrixvesiceln sowie ein starke Abnahme des Gehalts an sulfonierten Mucopolysacchariden. In den mit Kortison behandelten Ratten sind Hydroxylapatikristalle nachweisbar, wenn auch weniger zahlreich als in den mit Propylthiourazil behandelten. Dem entspricht auch eine leicht reduzierte Calciumablagerung sowie eine Mitochondrialgranulation die derjenigen der anderen Ratten überlegen ist; Matrixvesiceln sind weniger zahlreich und sulfonierte Mucopolysaccharide sind deutlicher nachweisbar als in den Tieren, die Propylthiourazil erhielten. Fasten führt zu einem auffallenden Verlust an Hydroxylapatitkristallen. Diese können sogar nicht mehr zu erkennen sein. Dies hängt mit verminderter Calciumablagerung zusammen sowie einer Zunahme der Mitochondrialgranulation. Dies ist vermutlich Ausdruck einer Transportverzögerung zur extrazellularen Matrix. Nach Fasten ist auch die Anzahl der Matrixvesiceln auffallend herabgesetzt, und der Gehalt an sulfonierten Mucopolysacchariden ist größer als in den mit Kortison bzw. Propylthiourazil behandelten Tieren.
    Notizen: Abstract Comparison of mineralization in the hypertrophic zone of the tibial epiphyseal plate in immature rats was carried out after treatment with cortisone, propylthiouracil, or after fasting. Under normal conditions, in the extracellular matrix at the calcification front, calcium and phosphate increased, sulfated mucopolysaccharides decreased, and matrix vesicles, which serve as the locus for the formation of hydroxyapatite crystals, increased. In propylthiouracil-treated rats, hydroxyapatite crystals were prominent, related to an increase in calcium deposition, a decrease of mitochondrial granules (thought to contain calcium and phosphate), an increase in the number of matrix vesicles, and to a marked decrease in the amount of sulfated mucopolysaccharide. In cortisone-treated rats, hydroxyapatite crystals were present but they were not as numerous as in the propylthiouracil-treated rats. Correspondingly, calcium deposition was slightly reduced, mitochondrial granules were more numerous than in the previous groups of rats, matrix vesicles were less numerous, and sulfated mucopolysaccharide were more prominent than in the propylthiouracil-treated rats. In fasted rats, hydroxyapatite crystals were markedly reduced or absent, and related to a decrease in calcium deposition, an increase in the number of mitochondrial granules (suggesting a delay in transport to the extracellular matrix). Matrix vesicles were markedly reduced in number, and sulfated mucopolysaccharide much more prominent than in either the cortisone or the propylthiouracil-treated rats.
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  • 5
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    Springer
    Calcified tissue international 5 (1970), S. 170-182 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Cartilage ; Bone ; Gonadectomy ; Histochemistry
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Des coupes de tibias de rats mâles et femelles, gonadectomisés et témoins, sont soumises à divers examens histologiques et histochimiques pour étudier les effets de la gonadectomie au niveau du tissu osseux. Le cartilage épiphysaire proximal des rats castrés et des rattes, ayant subi l'ablation des ovaires, est oblitéré par de l'os 5 mois après l'intervention. En outre, la diaphyse présente une ostéoporose. La matrice intercellulaire du cartilage épiphysaire des rats gonadectomisés est fortement PAS positive, contrairement à la réaction fortement alcian positive de la matrice des animaux témoins. Les travées diaphysaires des rats gonadectomisés se colorent en rouge avec le PAS et contiennent des régions étendues d'ilôts cartilagineux calcifiés. En outre, le cartilage épiphysaire et les travées osseuses de ces animaux se colorent faiblement à la ninhydrine-Schiff. Les réactions colorées suggèrent que la gonadectomie induit une altération dans le degré d'agrégation protéino-mucopolysaccharidique de la matrice organique; ce qui interfère probablement avec la minéralisation osseuse.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Tibiaschnitte von unbehandelten und kastrierten männlichen und weiblichen Ratten wurden mit verschiedenen histologischen und histochemischen Techniken untersucht, um die Knochenveränderungen im Anschluß an die Gonadektomie zu bestimmen. Es wurde beobachtet, daß sowohl beim kastrierten Männchen wie beim ovarektomierten Weibchen der proximale Epiphysenknorpel nach dem fünften postoperativen Monat durch Knochen „eingekapselt” ist. Dazu wurde auch eine Osteoporese des Knochenschaftes beobachtet. Der Epiphysenknorpel der kastrierten Ratten zeigte eine intensiv PAS-positive interzelluläre Matrix, im Gegensatz zu der alcianophil reagierenden Matrix von Kontrolltieren. Die Diaphysentrabekel von kastrierten Ratten färbten sich mit PAS rot und enthielten große Bezirke von mineralisierten Knorpelkernen. Dazu färbten sich der Epiphysenknorpel und die Trabekel dieser Tiere nur schwach mit der Ninhydrin-Schiff-Reaktion. Die Resultate der verschiedenen Färbungen zeigten, daß nach Gonadektomie eine Veränderung im Aggregatzustand der Protein-Mucopolysaccharidkomponente der organischen Matrix stattfindet, was zu einer Interferenz im Knochenmineralisationsprozeß führen könnte.
    Notizen: Abstract Sections of the tibias from both intact and gonadectomized male and female rats were subjected to various histological and histochemical methods to determine the changes in the bone following gonadectomy. It was observed that both in castrated males and in ovariectomized females, the proximal epiphyseal cartilage became “sealed off” by bone after the fifth post-surgical month. In addition osteoporosis of the shaft of the bone was also observed. The epiphyseal cartilage of the gonadectomized rats exhibited intense PAS positive intercellular matrix in contrast to the alcianophilic ature of the matrix from control animals. The diaphyseal trabeculae from gonadectomized rats stained red with PAS and contained wide regions of calcified cartilage cores. In addition, the epiphyseal cartilage and bony trabeculae from these animals stained faintly in the ninhydrin-Schiff reaction. The staining reactions indicated that in gonadectomy there was an alteration in the state of aggregation of protein-mucopolysaccharide component of the organic matrix, a situation which would result in an interference in the mineralization of the bone.
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  • 6
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    Springer
    Calcified tissue international 6 (1970), S. 55-69 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Glycosaminoglycans ; Cartilage ; Embryo ; Limb ; Chick
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Des données microchimiques quantitatives ont pu être obtenues sur les glycosaminoglycanes du cartilage embryonnaire de poulet, en voie de développement. Le glycosaminoglycane principal est constitué par le sulfate de chondroitine. Cette substance apparait en même temps que la différenciation histologique des membres et augmente rapidement en même temps que le cartilage des membres s'accroit. Des quantités significatives d'autres glycosaminoglycanes n'ont pu être retrouvées dans les membres totaux, les rudiments osseux ou dans des échantillons cartilagineux. Les caractéristiques du sulfate de chondroitine, obtenu par fractionnent au chlorure de cetylpyridinium, sont les mêmes pour tous les échantillons, y compris pour le cartilage qui diffère nettement par sa morphologie et sa réponse fonctionnelle. Des augmentations significatives en fonction de l'âge sont observées pour la concentration tissulaire de sulfate de chondroitine des rudiments osseux jeunes et de deux des trois zones histologiques de cartilage tibial. Les concentrations plus élevées, observées dans la zone hypertrophique, au cours des divers stades du développement du tibia, et l'augmentation marquée de la concentration dans cette zone au moment de la formation osseuse accélérée semblent indiquer que cette augmentation est liée à l'ossification en milieu cartilagineux.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Diese Untersuchung hat quantitative mikrochemische Resultate über den Gehalt an Glucosaminoglucanen im Knorpel des sich entwickelnden Hühnerembryos ergeben. Das hauptsächlich vorkommende Glucosaminoglucan war Chondroitinsulfat. Diese Substanz erschien gleichzeitig mit dem histologischen Auftreten von Knorpel in den Extremitäten und erhöhte sich rasch bei Zunahme des Knorpels in diesen. Signifikante Mengen anderer Glucosaminoglucane konnten weder in ganzen Extremitäten, noch in Knochenrudimenten oder mikroskopisch präparierten Knorpelproben nachgewiesen werden. Die mit der Cetylpyridinchloridfraktionierung gefundenen Charakteristika des Chondroitinsulfates waren für alle diese Proben dieselben, sogar wenn die Knorpelproben ausgesprochene Abweichungen in bezug auf Morphologie und bekannte funktionelle Eigenschaften zeigten. Eine signifikante, altersbedingte Zunahme der Chondroitinsulfatkonzentration im Gewebe konnte in jungen Gesamtknochenrudimenten und in 2 der 3 histologiscchen Zonen des Tibiaknorpels nachgewiesen werden. Die höheren Konzentrationen, die in den hypertrophischen Zonen in allen Stadien der Tibiaentwicklung beobachtet werden konnten und die deutliche Konzentrationszunahme in diesem Gebiet während der beschleunigten Knochenbildung liessen vermuten, daß diese Zunahme mit der endochondralen Knochenbildung in Zusammenhang steht.
    Notizen: Abstract This study provides quantitative microchemical data on the glycosaminoglycans of developing chick embryo cartilage. The major glycosaminoglycan was chondroitin sulfate, which appeared co-incidentally with cartilage in the limbs and rapidly increased as the amount of cartilage increased. Significant amounts of other glycosaminoglycans were not found in whole limbs, whole bone rudiments or microscopically-dissected cartilage samples. The characteristics of the chondroitin sulfate as revealed by cetylpyridinium chloride fractionation were the same for all of these samples, even cartilage samples differing markedly in morphology and known functional response. Significant age-related increases in tissue concentration of chondroitin sulfate were demonstrated in early whole bone rudiments, and in two of the three histologic zones of tibial cartilage. The higher concentrations observed in the hypertrophic zone at all stages of tibial development and the marked increase in the concentration in this region at a time of accelerated bone formation suggested that this increase is related to endochondral bone formation.
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  • 7
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    Springer
    Calcified tissue international 7 (1971), S. 290-298 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Proteinpolysaccharides ; Cartilage ; Calcification ; Binding
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les protéines-polysaccharides (PP-L) de zones «au repos» et «en voie de calcification» de cartilage d'omoplate et de cloison nasale de veaux sont extraits à l'aide d'une solution aqueuse à 0.15 M KCl et fractionnés en une série de produits: PP-L3, PP-L4, PP-L5, PP-L6. Une fraction supplémentaire protéino-polysaccharidique, PP-L2, est extraite à partir des restes cartilagineux à l'aide d'hydroxylamine. Des différences de composition chimique parmi les fractions protéino-polysaccharides, obtenues à partir de ces trois sources de cartilage, son généralement faibles. La propriété de liaison du calcium des échantillons de PP-L, PP-L2, PP-L3, déterminée par la mesure de dialyse d'équilibre, semble principalement en rapport avec les contenus en acide uronique et en sulfate échangeable. L'application d'une technique d'échange cationique indique que le PP-L de zones «au repos» et «en voie de calcification» de cartilage de l'omoplate a des affinités identiques pour des quantités de calcium radioactif. Cependant, l'affinité de PP-L des deux zones de cartilage de l'omoplate pour des quantités de calcium radioactif est plus élevé que celle de PP-L de la cloison nasale. Les résultats obtenus ne montrent pas de différences suffisantes dans la composition chimique et l'affinité pour le calcium des protéines-polysaccharides de cartilage «au repos» et «en voie de calcification» de l'omoplate, pour rendre compte de l'enrichissement en calcium de la zone «en voie de calcification».
    Kurzfassung: Zusammenfassung Proteinpolysaccharide (PP-L) von „ruhenden” und „verknöchernden” Zonen von Kalbs-Scapula-Knorpel und von Kalbs-Nasenseptum-Knorpel wurden mit wäßrigem 0,15 M KCl extrahiert und zu einer Serie von Produkten fraktioniert: PP-L3, PP-L4, PP-L5, PP-L6. Eine zusätzliche Proteinpolysaccharidfraktion, PP-L2, wurde mit Hydroxylamin aus den Knorpelrückständen extrahiert. Die Unterschiede in der chemischen Zusammensetzung zwischen den entsprechenden Proteinpolysacchariden von den drei Knorpel-Quellen waren im allgemeinen klein. Die Calciumbindungsfähigkeit der PP-L, PP-L2 und PP-L3-Proben, gemessen durch Gleichgewichtsdialyse, schien hauptsächlich deren Gehalt an Uronsäure und austauschbarem Sulfat wiederzugeben. Die Anwendung einer Kationenaustausch-Technik deutete darauf hin, daß PP-L von „ruhenden” und „verknöchernden” Zonen von Scapulaknorpel eine ähnliche Affinität für Tracermengen von Calcium hat. Jedoch war die Affinität von PP-L für Tracermengen von Calcium aus beiden Zonen von Scapulaknorpel größer als diejenige von PP-L aus dem Nasenseptum. Die aus dieser Studie hervorgehenden Daten zeigen nicht genügend Unterschiede an zwischen der chemischen Zusammensetzung und der Calcium-affinität von Proteinpolysacchariden aus „ruhendem” und „verknöcherndem” Scapulaknorpel, um die Calciumaufnahme in der „verknöchernden” Zone zu erklären.
    Notizen: Abstract Proteinpolysaccharide (PP-L) of “resting” and “ossifying” zones of calf scapular cartilage and of calf nasal septum cartilage was extracted with aqueous 0.15 M KCl and fractionated into a series of products: PP-L3, PP-L4, PP-L5, PP-L6. An additional proteinpolysaccharide fraction, PP-L2, was extracted from the cartilage residues with hydroxylamine. Differences in chemical composition among corresponding proteinpolysaccharides obtained from the three cartilage sources were, in general, small. The calcium binding capacity of the PP-L, PP-L2, and PP-L3 samples, as measured by equlibrium dialysis, appeared to reflect principally their uronic acid and exchangeable sulfate contents. Application of a cation exchange technique indicated that PP-L from “resting” and “ossifying” zones of scapular cartilage had similar affinities for tracer quantities of calcium. However, the affinity of PP-L from both zones of scapular cartilage for tracer quantities of calcium was greater than that of PP-L from nasal septum. The data obtained from this study do not indicate sufficient differences between the chemical composition and calcium affinity of proteinpolysaccharides from “resting” and “ossifying” scapular cartilage to account for the calcium uptake in the “ossifying” zone.
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  • 8
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    Springer
    Calcified tissue international 8 (1971), S. 24-35 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Bone ; Cartilage ; Epiphysis ; Calcium ; Phosphorus ; Vitamin D
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les électrolytes ont été analysés dans le sérum et dans les tissues en voie de minéralisation, à des stades variables de calcification, chez des poulets et des pores normaux et rachitiques. L'humidité, les cendres et les matières organiques et déssèchées ont été analysées. Il apparait que d'autres électrolytes sériques, en plus du Ca, sont modifiés au cours du rachitisme. Le Mg et le P inorganique sont modifiés de façon variable au cours de l'avitaminose D. Des changements plus importants en contenu minéral des tissus sont observés dans les stades précoces de calcification que ceux que l'on a pu constater dans le sérum à des stades similaires, ce qui suggère un effet direct de l'avitaminose sur le tissu en voie de calcification. Quant au contenu du sérum, le dépôt de Ca est plus élevé dans les tissus d'animaux rachitiques par rapport aux témoins. Ceci n'est pourtant pas le cas du Mg ou du P inorganique, indiquant une affinité préférentielle du Ca pour le tissue rachitique. L'analyse gravimétrique de matières organiques et déssèchées des zones épiphysaires montre que les quantités de cartilage hypertrophique et en voie de dévelopment augmentent dans le cas de rachitisme, alors que le cartilage calcifié diminue, confirmant les observations histologiques antérieures. De manière inattendue, la proportion de cartilage au repos augmente au cours du rachitisme.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Die Elektrolyte im Serum und in mineralisierenden Geweben wurden zu verschiedenen Zeitpunkten der Verkalkung bei normalen Hühnern und Schweinen und bei solchen mit Vitamin D-Mangel analysiert. Wassergehalt, Asche, trockene und organische Substanz wurden ebenfalls gemessen. Die Ergebnisse zeigten, daß außer Ca auch andere Elektrolyte bei Rachitis verändert wurden. Mg und anorganischer P wurden durch den Vitaminmangel bei den beiden Gattungen verschiedenartig beeinflußt. In den Geweben wurde in den frühen Phasen der Verkalkung eine größere Änderung des Mineral-Spiegels gefunden, als dies zu übereinstimmenden Zeiten im Serum der Fall war, was auf eine direkte Wirkung des Vitaminmangels auf das verkalkende Gewebe schließen läßt. Im Verhältnis zum Serumspiegel wurde Ca in den Geweben der rachitischen Tiere zu einem größeren Grade als normal abgeschieden. Dies war nicht der Fall bei Mg oder anorganischem P, was einen Vorzug für Ca in den rachitischen Geweben anzeigt. Gravimetrische Analysen von organischer und trockener Substanz in epiphysischen Schichten zeigten, daß die Menge des proliferierenden und hypertrophischen Knorpels zunahm und daß verkalkter Knorpel bei Rachitis abnahm, gemäß klassischen histologischen Beobachtungen. achtungen. Ganz unerwartet war bei Rachitis eine verhältnismäßige Zunahme des ruhenden Knorpels festzustellen.
    Notizen: Abstract Electrolytes were analyzed in serum, and in mineralizing tissues at varying stages of calcification, in normal and vitamin D-deficient chickens and pigs. Moisture, ash, and organic matter were also measured. Results revealed that in addition to Ca, other serum electrolytes were altered in rickets. Mg and inorganic P were diversely affected by the vitamin deficiency. Larger changes in mineral level were seen in the tissues in the early stages of calcification than were seen at corresponding times in the serum, suggesting a direct effect of the vitamin deficiency on the calcifying tissue itself. Relative to the serum level, Ca was deposited in the tissues of rachitic animals to a greater extent than in normal animals. This was not true for Mg or inorganic P, indicating a preferential affinity for Ca in the rachitic tissue. Gravimetric analyses of organic and dry matter in epiphyseal zones revealed that the amounts of proliferating and hypertrophic cartilage were increased, and calcified cartilage decreased, in rickets, in accord with previous histological observations. Unexpectedly, the proportion of resting cartilage was also increased.
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    Springer
    Calcified tissue international 8 (1971), S. 54-72 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Morphology ; Glycosaminoglycans ; Cartilage ; Chemistry ; Audioradiography ; Healing
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Une perte de substance ostéo-cartilagineuse, de taille limitée et identique, est réalisée chez le lapin adulte et la cicatrisation est étudiée histologiquement et par autoradiographie après marquagein vitro au35S-sulfate. Une analyse microchimique est pratiquée pour le contenu et la composition en glycosaminoglycanes. 1. Entre la première semaine et la 4ème et 8ème semaine, un tissu conjonctif non-métachromatique se différencie en un cartilage métachromatique et la quantité de sulfate de chondroitine augmente de façon significative aux dépens des glycoprotéines. 2. Jusqu'à la 4ème semaine, la perte de substance est surtout comblée par de l'os néoformé: après cette période, la région est comblée au delà de la limite de la surface articulaire. 3. Le cartilage hyalin, ressemblant morphologiquement, autoradiographiquement et chimiquement au cartilage articulaire, en ce qui concerne la distribution en glycosaminoglycanes, constitute la surface articulaire de la perte de substance comblée dans un tiers des cas après 8 semaines. Le cartilage hyalin s'observe surtout dans les régions où de l'os néoformé a comblé la cavité médullaire. 4. Dans les deux tiers des cas, après 8 semaines, les surfaces articulaires des zones comblées comportent, non seulement du cartilage, mais aussi du tissu fibreux se formant essentiellement sur les parties latérales et dans les régions, où la cavité médullaire, fliant face, à la surface articulaire, n'a pas été comblée par du tissue osseux. La fraction glycoprotéique augmente par rapport à la fraction chondroitine sulfate. 5. Dans la majorité des cas, après 20 semaines, le cartilage néoformé subit des phénomènes dégénératifs, qui se traduisent par une diminution en chondroitine sulfate.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Bei ausgewachsenen Kaninchen wurde ein begrenzter, standardisierter, osteochondraler Defekt hervorgerufen, und das regenerierte Gewebe wurde histologisch und autoradiographisch durch Markierung in vitro mit35S-Sulfat und durch mikrochemische Bestimmung des Gehaltes und der Zusammensetzung der Glykosaminglykane untersucht. Die wichtigsten Befunde waren: 1. Zwischen 1 und 4–8 Wochen veränderte sich nichtmetachromatisches Bindegewebe zu metachromatisch gefärbtem Knorpel, und der Anteil an Chondroitin-Sulfat nahm auf Kosten der Glykoproteine signifikant zu. 2. Bis zu 4 Wochen war der Hauptteil des defekten Gebietes mit neugebildetem Knochen gefüllt; nach dieser Zeit lag dieser Bezirk oberhalb der Verknöcherungsgrenze in Richtung der Gelenkoberfläche. 3. Nach 8 Wochen bestand die Gelenkoberfläche des defekten Gebietes in einem Drittel der Fälle aus hyalinem Knorpel, der morphologisch, autoradiographisch und chemisch dem Gelenkknorpel in Bezug auf die Verteilung von Glykosaminoglykanen glich. Hyaliner Knorpel wurde hauptsächlich an Stellen beobachtet, wo neugebildeter Knochen die Markhöhle geschlossen hatte. 3. Nach 8 Wochen bestand die Gelenkoberfläche des defekten Gebietes in einem Drittel der Fälle aus hyalinem Knorpel, der morphologisch, autoradiographisch und chemisch dem Gelenkknorpel in Bezug auf die Verteilung von Glykosaminoglykanen glich. Hyaliner Knorpel wurde hauptsächlich an Stellen beobachtet, wo neugebildeter Knochen die Markhöhle geschlossen hatte. 4. Nach 8 Wochen bestanden Teile der Gelenkoberfläche des Defektes in zwei Dritteln der Fälle nicht nur aus Knorpel, sondern auch aus fibrösem Gewebe, welches vor allem in den seitlichen Teilen des Defektes und an Stellen vorlag, wo die Markhöhle gegenüber der Gelenkoberfläche nicht mit Knochengewebe verschlossen worden war. Die Glykoproteinfraktion nahm im Vergleich zur Chondroitin-Sulfatfraktion zu. 5. Nach 20 Wochen zeigten sich in den meisten Fällen bei neugebildetem Knorpel degenerative Veränderungen, welche durch eine gewisse Abnahme des Chondroitin-Sulfats wiedergegeben wurden.
    Notizen: Abstract A limited, standardized osteochondral defect was created in adult rabbits and the regenerated tissue was examined histologically and autoradiographically after labellingin vitro with35S-sulphate, and microchemically for its content and composition of glycosaminoglycans. The principal findings were: 1. Between 1 week and 4 to 8 weeks, non-metachromatic connective tissue differentiated to metachromatically stained cartilage, and the proportion of the chondroitin sulphate increased significantly at the expense of the glycoproteins. 2. Up to 4 weeks, the major part of the defect area was filled with newly formed bone; after this time, the area lay above the level of the “tidemark”, towards the articular surface. 3. Hyaline cartilage with morphological, autoradiographic and chemical resemblance to the articular cartilage in terms of the distribution of glycosaminoglycans constituted the articular surface of the defect area in one-third of the cases at observation times after 8 weeks. Hyaline cartilage was observed mainly in areas where newly formed bone had closed the medullary cavity. 4. In two-thirds of the cases, after 8 weeks, parts of the articular surface of the defect consisted not only of cartilage but also of fibrous tissue, occurring mainly in the lateral parts of the defect and in areas where the medullary cavity facing the articular surface had not been sealed by bone tissue. The glycoprotein fraction increased relative to the chondroitin sulphate fraction. 5. In most cases after 20 weeks, newly-formed cartilage underwent degenerative changes, which were reflected in some reduction of the chondroitin sulphate.
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    Springer
    Calcified tissue international 8 (1971), S. 106-113 
    ISSN: 1432-0827
    Schlagwort(e): Iliac crest ; Proteinpolysaccharide ; Cartilage ; Achondroplasia
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin , Physik
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Résumé Les protéines-polysaccharides (PP) ont été extraits par des méthodes de rupture et de dissociation, à partir de cartilage de crête iliaque de neuf enfants achondroplasiques, dont 8 filles et 1 garçon, âgés de huit à treize ans. A la fois l'homogénéisation à grande vitesse du tissu dans l'eau et l'incubation à l'aide de chlorure de guanidinium ont libéré des quantités normales de PP, à poids moléculaire élevé, du cartilage de jeunes enfants. Des échanitllons de cartilage d'enfants plus âgés ont libéré peu ou pas de PP après extraction par l'eau. Les PP, insolubles dans l'eau, se solubilisent dans du chlorure de guanidinium 4 M, des solutions non tamponnées de MgCl2 et du tampon phosphate 0.067 M. Alors que l'extrait à la guanidine contient, après dilution à 0,4 M du chlorure de guanidinium, un constituant à poids moléculaire élevé, des extraits de MgCl2, tamponnés au phosphate, ne contiennent que des PP dégradés de poids moléculaire peu élevé. L'insolubilité de PP dans l'eau, de cartilage d'enfants, âgés de plus de dix ans, est interprètée comme une manifestation secondaire liée soit aux changements mucoprotéiques, se déroulant dans le cartilage à cet âge ou à d'autres facteurs. L'anomalie biochimique primitive pourrait se situer au niveau de la macromolécule de PP qui, à un certain stade de maturation du tissu, se traduit soit par une altération de l'état d'agrégation, soit par un rapport anormal avec le collagène.
    Kurzfassung: Zusammenfassung Proteinpolysaccharide (PP) wurden mittels Homogenisierungs- und Extraktionsmethoden aus dem Beckenkamm-Knorpel von 9 achondroplastischen Kindern (8 Mädchen und 1 Knabe) im Alter von 8 bis 13 Jahren extrahiert. Sowohl eine hochtourige Homogenisierung des Gewebes in Wasser, als auch eine Inkubation mit Guanidinchlorid setzten normale PP-Mengen von hohem Molekulargewicht aus dem Knorpel von kleineren Kindern frei. Dagegen ergab die Wasserextraktion aus den Knorpelproben von größeren Kindern nur wenig oder kein PP-Material. Die wasserunlöslichen PP waren in 4 M Guanidinchlorid, ungepufferten MgCl2-Lösungen und 0,067 M Phosphatpuffer löslich. Während der Guanidinextrakt nach Verdünnung des Guanidinchlorids zu einer 0,4 M-Konzentration eine Komponente mit hohem Molekulargewicht enthielt, fand sich in MgCl2- und Phosphatpufferextrakten nur abgebautes PP-Material von niedrigem Molekulargewicht. Die Wasserunlöslichkeit von Knorpel-PP von über 10jährigen Kindern wird als sekundäre Erscheinung interpretiert, die entweder in Zusammenhang mit Mucopolysaccharid-Veränderungen steht, welche während dieses Alters im Knorpel auftreten, oder die auf andere unbekannte Faktoren zurückzuführen ist. Der primäre biochemische Defekt kann auf einer Abnormalität des PP-Makromoleküls beruhen, welche, bei einem gewissen Reifungsgrad des Gewebes, entweder in einem veränderten Aggregatzustand oder in einem abnormalen Verhältnis zur Kollagenmatrix zum Ausdruck kommt.
    Notizen: Abstract Proteinpolysaccharides (PP) have been extracted by disruptive and dissociative methods from iliac crest cartilage of nine achondroplastic children, eight girls and one boy, from eight to thirteen years of age. Both high speed homogenization of the tissue in water or incubation with guanidinium chloride released from the cartilage of younger children normal amounts of PP of high molecular weight. Cartilage samples obtained from older children released instead little or no PP material by water extraction. The water-insoluble PP were found soluble in 4 M guanidinium chloride, unbuffered MgCl2 solution and 0.067 M phosphate buffer. While the guanidine extract contained, after dilution of guanidinium chloride to 0.4 M, a high molecular weight component, MgCl2 and phosphate buffer extracts contained only degraded PP material of low molecular weight. The insolubility in water of PP of cartilage of children over ten years of age is interpreted as a secondary manifestation related either to mucopolysaccharide changes occurring in the cartilage at that age, or to other unknown factors. The primary biochemical defect could be an abnormality of the PP macromolecule which, at a certain stage of maturation of the tissue, is reflected either in an altered state of aggregation or in an abnormal relationship with the collagen matrix.
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