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    Springer
    Calcified tissue international 12 (1973), S. 169-173 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Calcification ; Histochemistry ; Autoradiography ; Fetal ; Mandible
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Des rats femelles reçoivent du45Ca ou du32P au 13ème et 18ème jour de la grossesse. Les coupes sériées des têtes de foetus sont étudiées par autoradiographie et par diverses méthodes histologiques pour déterminer la calcification. La détection la plus précoce de45Ca s'observe simultanément comme une réaction positive pour le calcium avec une des méthodes histologiques utilisées.32P est en évidence par les méthodes autoradiographiques un peu plus tard que le45Ca et sa présence coincide avec la réaction positive la plus précoce observée avec les autres méthodes histologiques utilisées. Les os de ces têtes foetales commencent à se calcifier selon un mode particulier commençant par la mandibule, puis l'os frontal et le maxillaire supérieur, suivis par les os nasaux, pariétaux et interpariétaux.
    Abstract: Zusammenfassung Weibliche Ratten erhielten45Ca und32P zwischen dem 13.–18. Tag der Schwangerschaft. Zur Ermittlung der Verkalkung wurden Serienschnitte der Köpfe ihrer Feten mittels Autoradiographie sowie durch verschiedene histologische Methoden untersucht. Das erste Auftreten von45Ca war ebenfalls von einer positiven Calciumreaktion mittels einer der verwendeten histologischen Methoden begleitet.32P wurde in der Autoradiographie erst etwas später als45Ca festgestellt und dessen Nachweis deckte sich mit den ersten positiven Reaktonen aller anderen verwendeten histologischen Methoden. Die Knochen in diesen Fetusköpfen begannen in einer bestimmten Sequenz zu verkalken: zuerst der Unterkiefer, dann das Stirnbein und der Oberkiefer, dann das Nasenbein, die Parietal- und Interparietalknochen.
    Notes: Abstract Female rats were given45Ca or32P from 13 to 18 days of pegnancy. Serial sections from the heads of their fetuses were studied by autoradiography, as well as by several histological methods for assessing calcification. The earliest detection of45calcium occured at the same time as a positive reaction for calcium with one of the histological methods used.32P was not detectable by autoradiographic methods until somewhat later than45Ca, and its presence coincided with the earliest positive reaction with all of the other histological methods employed. The bones in these fetal heads began to calcify in a partcular sequence, the mandible first, then the frontal bone and maxilla, followed by the nasal, parietal and interparietal bones.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 2
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    Springer
    Calcified tissue international 4 (1969), S. 260-268 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Histochemistry ; Staining ; Protein ; Polysaccharide ; Calcification
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Des coupes de cartilage épiphysaire frais de jeunes rats, effectuées à la main, sont colorées à pH=4,5 dans des solutions à 0,01% de divers colorants cationiques, appartenant aux groupes de la thiazine, oxazine, azine, triphénylméthane, acridine, et phthallocyanine. Les granules intracellulaires métachromatiques, mises en évidence antérieurement par le bleu de toluidine, sont également identifiées à l'aide de l'azur A, le bleu de méthylène et le bleu de crésyl. Les granules se colorent moins bien à la thionine, le rouge neutre, la safranine O, le bleu de toluylène et l'acridine orange. Dans les conditions utilisées, la matrice de la zone de réserve et la matrice de la zone hypertrophique inférieure (en voie de calcification) se colorent, alors que les matrices des zones prolifératives et hypertrophiques supérieures ne prennent pas les colorants. La gallocyanine, le violet cristal, la fuchsine basique, l'azocarmin B, le bleu de gallamine et la bleu alcian ne se colorent pas ou donnent des réactions colorées différentes de celles décrites ci-dessus. Il semble que le pK et le poids moléculaire des colorants jouent un rôle important, mais ils ne paraissent pas être les seuls facteurs intervenant dans la coloration des granules. Un changement, lié à la calcification, semble intervenir au niveau du matériel métachromatique (probablement des polysaccharides protéiques), aussi bien dans la matrice que les cellules cartilagineuses épiphysaires.
    Abstract: Zusammenfassung Handpräparierte Schnitte von frischem Epiphysenknorpel junger Ratten wurden bei einem pH von 4,5 in 0,01% igen Lösungen verschiedener kationischer Farbstoffe folgender Klassen gefärbt: Thiazin, Oxazin, Azin, Triphenylmethan, Acridin und Phthalocyanin. Die intracellulären β-und γ-metachromatischen Granula, erstmals mit Toluidinblau im frischen Gewebe nachgewiesen, konnten auch gut mit Azur A, Methylenblau und Brillantkresylblau dargestellt werden. Die Granula konnten ebenfalls, aber weniger gut, mit Thionin, Neutralrot, Safranin D, Toluylenblau und Acridinorange gefärbt werden. Unter diesen Färbungsbedingungen werden die inaktive Matrixzone und die untere hypertrophische (verkalkende) Matrixzone angefärbt, während die proliferative und die obere hypertrophische Matrixzone sich nicht färben. Gallocyanin, Kristallviolett, basisches Fuchsin, Azokarmin B, Gallaminblau und Alzianblau färbten entweder gar nicht, oder gaben ein anderes als das obenbeschriebene Färbemuster. Es wird vorgeschlagen, daß das pK und das Molekulargewicht der Farbstoffe wichtig aber nicht unbedingt die einzigen Faktoren sind, die die Färbung der Granula bestimmen. Die Resultate zeigen, daß eine Veränderung im metachromatischen Material (vermutlich Proteinpolysaccharide) vorliegt, und zwar sowohl in der Matrix als in den Zellen des Epiphysenknorpels; diese Veränderung scheint im Zusammenhang mit der Verkalkung zu stehen.
    Notes: Abstract Hand-cut sections of fresh epiphyseal cartilage from young rats were stained at pH 4.5 in 0.01% solutions of various cationic dyes of the thiazine, oxazine, azine, triphenylmethane, acridine, and phthallocyanin classes. The intracellular β-and γ-metachromatic granules, previously demonstrated in fresh tissues with toluidine blue, were also demonstrated well with azure A, methylene blue, and brilliant cresyl blue. The granules were also demonstrated, but not as well, by thionin, neutral red, safranin O, toluylene blue, and acridine orange. Under the conditions of staining, the reserve zone matrix and the lower hypertrophic (calcifying) zone matrix stained, whereas the proliferative and upper hypertrophic zone matrix did not stain. Gallocyanin, crystal violet, basic fuchsin, azocarmine B, gallamine blue, and alcian blue either did not stain, or gave a different pattern of staining from that described above. It is suggested that the pK and molecular weight of the dyes are important, but not necessarily the only factors in determining the staining of the granules. The results indicate that there is a change in the metachromatic material (presumably proteinpolysaccharide) in both the matrix and cells of epiphyseal cartilage, which appears to be related to calcification.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 3
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    Springer
    Development genes and evolution 196 (1987), S. 303-315 
    ISSN: 1432-041X
    Keywords: Embryonic chick skin ; Feather ; Morphogenesis ; Glycosaminoglycans ; Histochemistry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology
    Notes: Summary The distribution of glycosaminoglycans (GAGs) was studied in embryonic chick skin, using alcian blue staining with critical electrolyte concentration and glycanase treatment, immunofluorescence and transmission electron microscopy. Light microscopy revealed an uneven distribution of sulphated and non-sulphated GAGs at all stages of feather development. Along the dermal-epidermal junction and throughout the depth of the dermis, staining was stronger inside the feathers than in the interplumar skin. With increasing MgCl2 concentration, the decrease in stain intensity along the dermal-epidermal junction was stronger in interplumar skin than inside feather structures, indicating that sulphated GAGs are more abundant within feathers than in interplumar skin. The same differential sensitivity to electrolyte concentration was noted in the dermis, except at the feather placode stage, when labelling inside the dermal condensation was virtually wiped out at 0.6 M MgCl2 and higher concentrations, whereas it persisted in the surrounding dermis up to 0.8 M MgCl2, indicating that the dermal condensation contains a larger amount of hyaluronate than non-feather-forming dermis. Enzyme treatment of sections with Streptomyces hyaluronidase as compared with those treated with chondroitinase ABC corroborated these findings. Immunofluorescent detection of heparan sulphate proteoglycan revealed the presence of the antigen along the dermal-epidermal junction at all stages of feather development, with peaks of brightness in discrete spots of feather structures. Electron microscopy revealed the presence of ruthenium red and tannic acid positive material in the dermal-epidermal junctional zone and inside the dermis. The density of marked granules was somewhat higher in intraplumar than in interplumar regions. These observations demonstrate that certain sulphated and non-sulphated GAGs are distributed in a microheterogeneous manner, which appears to be related to the morphogenetic events of feather development. They are discussed in view of the possible role these components might play in dermal-epidermal interactions. They strengthen the notion, already gained from previous studies on the localization of interstitial collagens and fibronectin, that extracellular matrix components play an important structural and informative role in organogenesis.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 4
    ISSN: 1432-041X
    Keywords: Development ; Lectin ; Neoglycoprotein Glycoconjugate ; Histochemistry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology
    Notes: Abstract Protein-carbohydrate interactions are supposed to play key roles in the mechanisms of cell adhesion, biosignalling and intracellular routing, warranting the analysis of the developmental course of expression of epitopes of this system. Thus, a panel of carrier-immobilized carbohydrate ligands was used as probes, namely lactose,N-acetylgalactosamine,N-acetylglucosamine, mannose, fucose and maltose. Additionally, an antibody to an endogenous β-galactoside-binding lectin (anti-galectin-1), the biotinylated lectin and two further human lectins, namely the macrophage migration inhibitory factor-binding sarcolectin and serum amyloid P component (SAP) that displays selectivity for sulphated sugars and mannose-6-phosphate, were included. They enabled us to assess the extent of the presence of respective binding sites in fixed sections from human lungs (pulmonary epithelial cells), livers (hepatocytes) and hearts (myocard cells) of 10–50 weeks gestation. Invariably, specific binding was detected in the three organ types, at least in certain stages. In most of the cases, the intensity of staining exhibited developmental regulation. The apparent patterns reveal similarities between the different cell types, as seen with immobilizedN-acetylglucosamine as well as with labelled galectin-1 and sarcolectin. However, drastic differences among such patterns with nearly opposite developmental courses do also occur, as detected for carrier-attached mannose and maltose residues. These results point to a potential importance for the detected glycohistochemical features in human development and substantiate the possibility of differential regulation of the presence of binding sites for distinct sugars within a certain organ and between the individual cell types of the monitored organs.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 5
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    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 169-182 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Histochemistry ; Alkaline phosphatases ; Calcification ; Bone ; Teeth
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Notes: Abstract Activity of alkaline phosphatases in unfixed cold microtome setions from the lower first molar area of newborn mice was recorded by histochemical methods. A substrate specificity test included the following phosphate compounds: ATP, CTP, GTP, UTP, ADP, AMP, GP, PPi, MDP and naphthol AS-TR phosphate. Intense staining was obtained in osteoblasts, stratum intermedium of the enamel organ and odontoblasts with all the substrates, except PPi and MDP. Staining of skeletal muscle fibres was obtained only with triphosphates as substrates. Addition of-SH groups decreased the hydrolysis of triphosphate compounds in cells involved in mineralization while the hydrolysis of monophosphate was inhibited. In contrast triphosphatase activity in striated muscle was enhanced when-SH compounds were added. Demineralization with EDTA diminished the cytoplasmic staining but induced a nuclear staining in hard tissue forming cells when triphosphates were used as substrates. No cytoplasmic and only slight nuclear staining was seen with GP or AMP as substrates. The triphosphate hydrolyzing capacity of tongue muscle fibres was, however, increased after the decalcification treatment. Addition of Mg2+ ions to the incubation media distinctly lowered the hydrolysis of triphosphates in the investigated tissues whereas the hydrolysis of ADP, AMP, GP and naphthol AS-TR phosphate remained unchanged. In view of the findings the triphosphatase activities at alkaline pH of muscle fibres and of cells related to hard tissue formation are considered to be due to activity of separate enzymes. The orthophosphate liberating enzyme activities at alkaline pH in osteoblasts, stratum intermedium and odontoblasts may be expressions of the catalytic functions of one common enzyme. Furthermore, the results indicate that CaATP might be the substrate used by the alkaline ATPase in mineralizing areas.
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  • 6
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    Springer
    Calcified tissue international 5 (1970), S. 170-182 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Bone ; Gonadectomy ; Histochemistry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Des coupes de tibias de rats mâles et femelles, gonadectomisés et témoins, sont soumises à divers examens histologiques et histochimiques pour étudier les effets de la gonadectomie au niveau du tissu osseux. Le cartilage épiphysaire proximal des rats castrés et des rattes, ayant subi l'ablation des ovaires, est oblitéré par de l'os 5 mois après l'intervention. En outre, la diaphyse présente une ostéoporose. La matrice intercellulaire du cartilage épiphysaire des rats gonadectomisés est fortement PAS positive, contrairement à la réaction fortement alcian positive de la matrice des animaux témoins. Les travées diaphysaires des rats gonadectomisés se colorent en rouge avec le PAS et contiennent des régions étendues d'ilôts cartilagineux calcifiés. En outre, le cartilage épiphysaire et les travées osseuses de ces animaux se colorent faiblement à la ninhydrine-Schiff. Les réactions colorées suggèrent que la gonadectomie induit une altération dans le degré d'agrégation protéino-mucopolysaccharidique de la matrice organique; ce qui interfère probablement avec la minéralisation osseuse.
    Abstract: Zusammenfassung Tibiaschnitte von unbehandelten und kastrierten männlichen und weiblichen Ratten wurden mit verschiedenen histologischen und histochemischen Techniken untersucht, um die Knochenveränderungen im Anschluß an die Gonadektomie zu bestimmen. Es wurde beobachtet, daß sowohl beim kastrierten Männchen wie beim ovarektomierten Weibchen der proximale Epiphysenknorpel nach dem fünften postoperativen Monat durch Knochen „eingekapselt” ist. Dazu wurde auch eine Osteoporese des Knochenschaftes beobachtet. Der Epiphysenknorpel der kastrierten Ratten zeigte eine intensiv PAS-positive interzelluläre Matrix, im Gegensatz zu der alcianophil reagierenden Matrix von Kontrolltieren. Die Diaphysentrabekel von kastrierten Ratten färbten sich mit PAS rot und enthielten große Bezirke von mineralisierten Knorpelkernen. Dazu färbten sich der Epiphysenknorpel und die Trabekel dieser Tiere nur schwach mit der Ninhydrin-Schiff-Reaktion. Die Resultate der verschiedenen Färbungen zeigten, daß nach Gonadektomie eine Veränderung im Aggregatzustand der Protein-Mucopolysaccharidkomponente der organischen Matrix stattfindet, was zu einer Interferenz im Knochenmineralisationsprozeß führen könnte.
    Notes: Abstract Sections of the tibias from both intact and gonadectomized male and female rats were subjected to various histological and histochemical methods to determine the changes in the bone following gonadectomy. It was observed that both in castrated males and in ovariectomized females, the proximal epiphyseal cartilage became “sealed off” by bone after the fifth post-surgical month. In addition osteoporosis of the shaft of the bone was also observed. The epiphyseal cartilage of the gonadectomized rats exhibited intense PAS positive intercellular matrix in contrast to the alcianophilic ature of the matrix from control animals. The diaphyseal trabeculae from gonadectomized rats stained red with PAS and contained wide regions of calcified cartilage cores. In addition, the epiphyseal cartilage and bony trabeculae from these animals stained faintly in the ninhydrin-Schiff reaction. The staining reactions indicated that in gonadectomy there was an alteration in the state of aggregation of protein-mucopolysaccharide component of the organic matrix, a situation which would result in an interference in the mineralization of the bone.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 7
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 24 (1977), S. 119-125 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Protein ; Lipid ; Histochemistry ; Enamel
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Notes: Summary Staining reactions for a number of histochemical procedures for lipophilic staining and protein were studied in the enamel matrix along the length of rat incisors. Sudan Black gave a positive stain across the whole thickness of very early enamel (up to 30 μm) but this staining only continued as a narrow band close to the ameloblasts as the enamel matured. A variety of tests for protein produced almost identical staining patterns in enamel matrix up to 100 μm thick. Since the pattern of “lipid” staining persisted, after using a number of procedures which could normally be expected to remove lipid, it is suggested that Sudan Black positive staining may be due to lipophilic protein rather than lipid itself. Fluoride did not significantly alter the staining reactions for “lipid” and protein but did proceduce matrix which was much more effectively stained by cross-linking agents FFDNB and FF sulphene.
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  • 8
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 7 (1971), S. 267-276 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Tech ; Development ; Enamel ; Enzyme ; Histochemistry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé L'activité en naphtylamidase est étudiéc au niveau des incisives et molaires de rat, à divers stades de développement. Du L-leucyl-4-methoxy-2-naphtylamide, du L-alanyl-4-methoxy-2-naphtylamide, du L-leucyl-2-naphthylamide et du DL-alanyl-2-naphtylamide sont utilisés comme substrats: du bleu rapide B et du grenat rapide GBC sont employés comme sels de diazonium. Le naphtylamidase n'est pas visible au niveau de dents, en voie de dévelopment, au cours de la formation matricielle de l'émail. A la fin de ce stade, le naphtylamidase est présent au niveau de l'extrémité distale des améloblastes, près de la surface de l'émail. L'activité enzymatique reste identique jusqu'au moment de la fusion de l'épithélium dentaire et de l'épithélium buccal, au moment de l'éruption de la dent dans la cavité buccale. On ne rencontre pas de naphtylamidase au niveau d'autres tissues dentaires; cependant une activité marquée est observée dans les ostéoclastes au niveau des surfaces de résorption de l'os alvéolaire, entourant les dents, en voie de développement et d'éruption, et dans certaines régions du tissu conjonctif.
    Abstract: Zusammenfassung Die Aktivität der Naphthylamidase wurde in den Backen- und Schneidezähnen von Ratten in verschiedenen Entwicklungsstufen studiert. Als Substrate wurden L-leucyl-4-methoxy-2-naphthylamid, L-alanyl-4-methoxy-2-naphthylamid, L-leucyl-2-naphthylamid und DL-alanyl-2-naphthylamid verwendet; als Diazoniumsalze dienten Echtblau B und Echt-Granat GBC. Naphthylamidase konnte während der Schmelzmatrixbildung im Zahn nicht nachgewiesen werden. Nach Abschluß dieser Phase erschien Naphthylamidase in den distalen Enden der Ameloblasten, nahe bei der Schmelzoberfläche. Die Enzymtätigkeit blieb am selben Ort lokalisiert, bis das Zahnepithel, im Augenblick wo der Zahn in die Mundhöhle durchstößt, in das Mundepithel überging. Naphthylamidase wurde in anderen Zahngeweben nicht gefunden, aber eine deutliche Aktivität konnte in gewissen Bezirken des Bindegewebes sowie in den Osteoklasten der resorbierenden Oberflächen vom alveolären Knochen festgestellt werden, welcher die sich bildenden und die hervorstoßenden Zähne umgibt.
    Notes: Abstract Naphthylamidase activity was studied in rat molar and incisor teeth at different stages of development. L-leucyl-4-methoxy-2-naphthylamide, L-alanyl-4-methoxy-2-naphthylamide, L-leucyl-2-naphthylamide and DL-alanyl-2-naphthylamide were used as substrates and Fast blue B and Fast Garnet GBC as diazonium salts. Naphthylamidase was not demonstrable in the teeth during enamel matrix formation. After the termination of this stage, naphthylamidase was present in the ameloblasts in their distal ends close to the enamel surface. The enzyme activity retained this localization until the dental epithelium fused with the oral epithelium at the time of tooth eruption into the oral cavity. Naphthylamidase was not found in other dental tissues, but marked activity was found in osteoclasts at the resorbing surfaces of alveolar bone surrounding the developing and erupting teeth and in certain areas of the connective tissue.
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  • 9
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    Springer
    Calcified tissue international 10 (1972), S. 49-57 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Histochemistry ; Cartilage ; Enzymes ; Vitamin D ; Starvation
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé 1. La distribution quantitative de phosphatase alcaline et de déshydrogénas eglucose-6-phosphate dans les zones hypertrophiques, en voie de prolifération du cartilage de rats rachitiques, pendant la cicatrisation induite par l'administration de vitamin D ou par jeun prolongé, est étudiée. 2. L'activité en phosphatase alcaline de la zone hypertrophique est environ triple de celle de la zone de prolifération du rat sevré normal et environ quadruple de celle des rats rachitiques. 3. Apres administration d'une seule dose de vitamine D (8000 unités), il se produit une augmentation significative de l'activité en phosphatase alcaline de la a zone en voie de prolifération. Une augmentation moins nette est observée dans la zone de prolifération de rats ayant jeuné 48 heures. 4. On observe une diminution significative de l'activité en phosphatase alcaline de la partie centrale de la zone hypertrophique de cartilage aprés traitement a la vitamine D. Une telle diminution n'a pas été observée chez le rat qui jeûne. 5. Chez le rat sevré normal, l'activité en déshydrogénase glucose-6-phosphate (G-6-PDH) est plus élevée dans la zone de prolifération que dans la zone hypertrophique. Chez le rat rachitique non traité, le contenu en enzyme est à peu pres identique dans les deux zones. 6. Apres traitement a la vitamine D, on note une décroissance nette de l'activité en G-6-PDH. Une telle décroissance n'est pas observée chez le rat qui jeûne.
    Abstract: Zusammenfassung 1. Diese Arbeit beschreibt die quantitative Verteilung der alkalischen Phosphatase und der Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase in proliferierenden und hypertrophischen Zonen von rachitischem Rattenknorpel während der durch Vitamin D-Gabe hervorgerufenen Heilung oder während der Mangeldiät. 2. Die Aktivität der alkalischen Phosphatase in der hypertrophischen Zone war etwa dreimal so groß wie in der proliferierende Zone der normalen entwöhnten Ratte und etwa viermal so groß bei den rachitischen Ratten. 3. Nach einer einmaligen Vitamin D-Gabe (8000 i.E) erfolgte eine signifikante Erhöhung der alkalischen Phosphatasen-Aktivität in der proliferierenden Zone. Eine weniger signifikante Erhöhung wurde in der proliferierenden Zone von Ratten festgestellt, welche 48 Std gefastet hatten. 4. Nach Vitamin D-Behandlung erfolgte eine signifikante Abnahme der alkalischen Phosphatasen-Aktivität in der mittleren Region der hypertrophischen Zone des Knorpels. Bei den fastenden Ratten wurde keine solche Abnahme beobachtet. 5. Bei der normalen entwöhnten Ratte war die Aktivität der Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G-6-PDH) größer in der proliferierenden als in der hypertrophischen Zone. Bei der unbehandelten rachitischen Ratte war der Enzymgehalt in beiden Zonen etwa gleich. 6. Nach Vitamin D-Behandlung erfolgte eine merkliche Abnahme der G-6-PDH-Aktivität. Bei der fastenden Ratte wurde keine solche Abnahme beobachtet.
    Notes: Abstract 1. The quantitative distribution of alkaline phosphatase and glucose-6-phosphate dehydrogenase in proliferating and hypertrophic zones of rachitic rat cartilage during healing induced by vitamin D administration or starvation is presented. 2. Alkaline phosphatase activity in the hypertrophic zone is about three times greater than that of the proliferating zone of the normal weanling rat and approximately four times greater in the rachitic rats. 3. Following a single dose of vitamin D (8000 I. U.) there was a significant elevation in alkaline phosphatase activity of the proliferating zone. A less significant increase was observed in the proliferating zone of rats which had breen fasted 48 hours. 4. There was a significant decrease in the alkaline phosphatase activity of the central region of hypertrophic zone of cartilage after vitamin D treatment. No such decrease was observed in the fasted rats. 5. In the normal weanling rat glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6-PDH) activity was greater in the proliferating zone as compared to the hypertrophic zone. In the untreated rachitic rat the enzyme content was about the same in the two zones. 6. Following vitamin D treatment there was an appreciable decrease in the G-6-PDH activity. No such decrease was observed in the fasted rat.
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  • 10
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Mineralization ; Histochemistry ; Matrix vesicles
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les expériences portent sur la minéralisation de la plaque épiphysaire tibiale du rat de souche Long-Evans, étudiée après traitement à la cortisone, propylthiouracile ou après jeûn prolongé. Dans des conditions normales, le calcium et le phosphate augmentent au niveau de la matrice extracellulaire, alors que les mucopolysaccharides sulfonés diminuent. Par contre, les vésicules de la matrice au niveau desquels se forment les cristaux d'hydroxyapatite, augmentent. Dans les rats ayant subi un traitement à la propylthiouracile, les cristaux d'hydroxyapatite sont très apparents. Ceci est du à une augmentation du dépôt en calcium, et à une diminution des granules des mitochondries qui contiennent probablement du calcium et du phosphate. En outre, une augmentation du nombre des vésicules de la matrice est visible ainsi qu'une décroissance de la quantité des mucopolysaccharides sulfonés. Dans les rats traités à la cortisone, les cristaux d'hydroxyapatite sont présents, mais dans une quantité moindre que dans les rats ayant subi l'effet du propylthiouracile. Le dépôt en calcium est légèrement réduit; les granules des mitochondries sont plus nombreuses que dans les groupes précédents, le nombre des vesicules de la matrice est plus faible, et les mucopolysaccharides sulfonés sont plus apparents que dans les rats traités à la propylthiouracile. Dans les rats ayant subi l'effet du jeûn, les cristaux d'hydroxyapatite sont fortement réduits ou entièrement absents. Ceci est du à une réduction de dépôt du calcium, une augmentation du nombre des granules des mitochondries (ce qui semble indiquer que les phénomènes de transport vers la matrice extracellulaire sont ralentis), alors que les vésicules de la matrice sont présentes dans des quantités réduites. Les mucopolysaccharides sont plus apparents que dans les animaux traités à la cortisone ou à la propylthiouracile.
    Abstract: Zusammenfassung Die Untersuchung beruht auf einem Vergleich der Mineralisation in der hypertrophischen Zone in der Epiphysealplatte von Long Evans Ratten die mit Kortison, Propylthiourazil oder einfachem Fasten behandelt wurden. Unter Normalbedingungen lassen sich in der extrazellulären Matrix der Calcifikationszone die folgenden Veränderungen beobachten: der Gehalt an Calcium und Phosphat nimmt zu, derjenige an Mukopolysacchariden nimmt ab, während die Matrixvesiclen, in denen sich die Bildung des Hydroxylapatits vollzieht, zunehmen. In Ratten die mit Propylthiourazil behandelt wurden, treten die Hydroxylapatitskristalle besonders hervor. Dies hängt mit einer Zunahme der Calciumablagerung zusamen sowie einer Abnahme der Mitochondriengranulation (in denen vermutlich Calcium und Phosphat enthalten sind). Ferner hängt damit zusammen eine numerische Zunahme der Matrixvesiceln sowie ein starke Abnahme des Gehalts an sulfonierten Mucopolysacchariden. In den mit Kortison behandelten Ratten sind Hydroxylapatikristalle nachweisbar, wenn auch weniger zahlreich als in den mit Propylthiourazil behandelten. Dem entspricht auch eine leicht reduzierte Calciumablagerung sowie eine Mitochondrialgranulation die derjenigen der anderen Ratten überlegen ist; Matrixvesiceln sind weniger zahlreich und sulfonierte Mucopolysaccharide sind deutlicher nachweisbar als in den Tieren, die Propylthiourazil erhielten. Fasten führt zu einem auffallenden Verlust an Hydroxylapatitkristallen. Diese können sogar nicht mehr zu erkennen sein. Dies hängt mit verminderter Calciumablagerung zusammen sowie einer Zunahme der Mitochondrialgranulation. Dies ist vermutlich Ausdruck einer Transportverzögerung zur extrazellularen Matrix. Nach Fasten ist auch die Anzahl der Matrixvesiceln auffallend herabgesetzt, und der Gehalt an sulfonierten Mucopolysacchariden ist größer als in den mit Kortison bzw. Propylthiourazil behandelten Tieren.
    Notes: Abstract Comparison of mineralization in the hypertrophic zone of the tibial epiphyseal plate in immature rats was carried out after treatment with cortisone, propylthiouracil, or after fasting. Under normal conditions, in the extracellular matrix at the calcification front, calcium and phosphate increased, sulfated mucopolysaccharides decreased, and matrix vesicles, which serve as the locus for the formation of hydroxyapatite crystals, increased. In propylthiouracil-treated rats, hydroxyapatite crystals were prominent, related to an increase in calcium deposition, a decrease of mitochondrial granules (thought to contain calcium and phosphate), an increase in the number of matrix vesicles, and to a marked decrease in the amount of sulfated mucopolysaccharide. In cortisone-treated rats, hydroxyapatite crystals were present but they were not as numerous as in the propylthiouracil-treated rats. Correspondingly, calcium deposition was slightly reduced, mitochondrial granules were more numerous than in the previous groups of rats, matrix vesicles were less numerous, and sulfated mucopolysaccharide were more prominent than in the propylthiouracil-treated rats. In fasted rats, hydroxyapatite crystals were markedly reduced or absent, and related to a decrease in calcium deposition, an increase in the number of mitochondrial granules (suggesting a delay in transport to the extracellular matrix). Matrix vesicles were markedly reduced in number, and sulfated mucopolysaccharide much more prominent than in either the cortisone or the propylthiouracil-treated rats.
    Type of Medium: Electronic Resource
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