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  • 1970-1974  (9)
  • 1974  (9)
  • 1
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    Springer
    Calcified tissue international 16 (1974), S. 183-192 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Mucopolysaccharides ; Spondyloepiphyseal dysplasia ; Cartilage ; Growth defects
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Notes: Abstract Iliac crest cartilage biopsies from five children with spondyloepiphyseal dysplasia congenita contained increased amounts of chondroitin-6-sulfate and keratan sulfate. The increase was similar to that observed in the cartilage of patients with Morquio's disease. However, unlike patients with Morquio's disease, those with spondyloepiphyseal dysplasia congenita did not excrete an abnormal amount of keratan sulfate in urine. Spondyloepiphyseal dysplasia congenita can be considered a mucopolysaccharidosis without mucopolysacchariduria.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 2
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 251-255 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Bone ; Vitamin A ; Phosphatases
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Au cours d'une étude du cartilage épiphysaire de poulets normaux et déficients en vitamine A, la composition organique et l'activité phosphatasique du cartilage au repos, du cartilage en voie d'ossification et de l'os nouvellement formé ont été mesurées. Le cartilage en voie d'ossification et l'os nouvellement formé ont un contenu plus élevé en matériel inorganique, phosphate et collagène que le cartilage au repos. Une déficience en vitamine A provoque une augmentation du contenu en phospholipide de tous les trois tissus. Le cartilage au repos, en cas de déficience en vitamine A, présente, après homogénéisation et centrifugation, un surnageant dont l'activité en phosphatase alcaline et en glycérophosphatase est plus élevée que celle des témoins. Il semble que les effets enzymatiques de l'avitaminose A soient liés à des altérations de la membrane lysosomiale avec décharge de phosphatases. La minéralisation normale semble aussi faire intervenir une activité phosphatasique.
    Abstract: Zusammenfassung Diese Arbeit beschreibt Untersuchungen des Epiphysenknorpels bei normalen Küken und solchen mit Vitamin-A-Mangel. Die organische Zusammensetzung und die Phosphatase-Aktivität in ruhendem Knorpel, ossifizierendem Knorpel und neugebildetem Knochen wurden gemessen. Der ossifizierende Knorpel und der neugebildete Knochen hatten einen höheren Gehalt an anorganischem Material, an Phosphat und Kollagen als der ruhende Knorpel. Vitamin-A-Mangel führte zu einem erhöhten Phospholipidgehalt in allen drei Geweben. Nach Homogenisierung und Zentrifugierung fand sich im Überstand des ruhenden Knorpels von Vitamin-A-Mangelgewebe eine höhere alkalische Phosphatase- und Glycero-phosphatase-Aktivität als bei den Kontrollen. Es wird angenommen, daß die Wirkung des Vitamin A-Mangels auf die Enzyme im Zusammenhang steht mit der Schädigung der lysosomalen Membran, wobei Phosphatasen freigesetzt werden, und daß die normale Mineralisierung die Phosphatasen-Aktivität ebenfalls anregt.
    Notes: Abstract This paper reports studies of the epiphyseal cartilage in normal and vitamin A deficient chicks. The organic composition and the phosphatase activity in the resting cartilage, ossifying cartilage and new bone were measured. The ossifying cartilage and new bone had a higher content of inorganic material, phosphate and collagen than the resting cartilage. Vitamin A deficiency caused increase in the phospholipid content of all three tissues. The resting cartilage from vitamin A deficient tissue had, after homogenisation and centrifugation, a supernatant with an activity of alkaline phosphatase and glycerophosphatase higher than that in control samples. It is considered that effects of vitamin A deficiency on enzymes are related to defects of the lysosomal membrane with release of phosphatases, and that normal mineralisation also involves phosphatases activity.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 3
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 275-281 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Calcification ; Cartilage ; Lipids ; Membranes ; Vesicles
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les vésicules matricielles sont des particules extracellulaires, entourées par une membrane, qui sont nombreuses dans la matrice du cartilage en voie de calcification et qui sont en rapport morphologique avec le dépôt minéral. Les vésicules matricielles et les cellules de l'épiphyse d'os longs d'embryons de veaux sont libérées par digestion grâce à la collagénase et séparées par centrifugation différentielle. Les vésicules ainsi obtenues sont riches en lipides et contiennent significativement plus de sphingomyéline et phosphatidyl sérine que les fractions cellulaires. Le rapport moles de cholestérol sur moles de phospholipides totaux est plus élevé dans les vésicules que dans les cellules; ce résultat est en accord avec l'origine des vésicules au niveau des membranes cellulaires des chondrocytes.
    Abstract: Zusammenfassung Matrixvesikel sind extrazelluläre, membrangebundene Teilchen, welche in der Matrix von verkalkendem Knorpel gehäuft vorkommen und welche in morphologischem Zusammenhang mit der Mineralablagerung in diesem Gewebe stehen. Matrixvesikel und Epiphysenzellen aus Röhrenknochen von Kalbsembryonen wurden mittels Collagenaseverdauung freigesetzt und durch Differential-Zentrifugierung getrennt. Die Vesikelpräparate waren reich an Lipidien und enthielten bedeutend mehr Sphingomyelin und Phosphatidylserin als die Zellfraktionen. Das molare Verhältnis Cholesterol/Gesamtlipide war in den Vesikeln höher als in den Zellen; dieser Befund stimmt mit der Tatsache überein, daß die Vesikel ihren Ursprung in den Plasmamembranen der Chondrozyten haben.
    Notes: Abstract Matrix vesicles are extracellular, membrane-bounded particles which are abundant in the matrix of calcifying cartilage and which are morphologically related to the deposition of mineral in this tissue. The matrix vesicles and cells of the epiphyses of the long bones of fetal calves were liberated by digestion with collagenase and separated by differential centrifugation. Vesicle preparations were found to be lipid-rich and to contain significantly more sphingomyelin and phosphatidyl serine than cellular fractions. The ratio, moles cholesterol to moles total phospholipid, was higher in vesicles than in cells, a finding which is consistent with vesicles having their origins in the plasma membranes of the chondrocytes.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 4
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 31-48 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Bone ; Cartilage ; Calcification ; Collagen ; Phosphate
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Une méthode pour l'étude de la croissance des os longs de foetus de rat, en culture d'organe, dans un milieu chimiquement défini, a été mise au point. Les extrémités cartilagineuses et les parties centrales de l'os sont analysées séparément pour leur croissance et minéralisation en étudiant leur contenu en collagène, calcium et phosphate, poids sec, et incorporation de proline marquée en hydroxyproline. La croissance et la minéralisation des parties centrales osseuses sont plus lentes dans un milieu chimiquement défini qu'in vivo. La croissance peut être accélérée en ajoutant au milieu des acides aminés non essentiels, de l'albumine ou du sérum. Les extrémités cartilagineuses présentent une augmentation plus importante en poids et contenu en collagène que les parties centrales et l'adjonction de diverses substances a moins d'effet sur la croissance. La croissance et la minéralisation des parties centrales sont augmentées en élevant la concentration du milieu en phosphate de 1.5 à 4.5 mM, avec ou sans adjonction de sérum ou d'albumine. A une concentration faible de calcium (0.5 mM), la croissance et la minéralisation des parties centrales sont arrêtées. A une concentration faible en magnésium (0.5 mM), la minéralisation est augmentée, mais la croissance est arrêtée.
    Abstract: Zusammenfassung Es wird eine Methode beschrieben, mit welcher das Wachstum der Röhrenknochen von Rattenembryos in einem chemisch bestimmten Medium in Organkultur untersucht werden kann. Die Knorpelenden und Knochenschäfte wurden gesondert auf Wachstum und Mineralisation geprüft, indem Collagen-, Calcium- und Phosphatgehalt, das Trockengewicht und der Einbau von markiertem Prolin in Hydroxyprolin gemessen wurden. Wachstum und Mineralisation des Knochenschaftes waren langsamer in einem chemisch bestimmten Medium als in vivo. Das Wachstum konnte beschleunigt werden, indem dem Medium nicht-essentielle Aminosäuren, Albumin oder Serum beigegeben wurden. Die Knorpelenden zeigten eine viel stärkere Zunahme an Gewicht und Collagengehalt als die Schäfte, und Anreicherung des Mediums hatte weniger Wirkung auf ihr Wachstum. Das Wachstum und die Mineralisation der Knochenschäfte nahmen zu, wenn die Phosphatkonzentration im Medium zwischen 1,5 und 4,5 mM erhöht wurde, und zwar unabhängig davon, ob dem Medium Serum oder Albumin beigegeben wurde oder nicht. Bei niederer Calciumkonzentration (0,5 mM) im Medium wurden Wachstum und Mineralisation der Knochenschäfte beeinträchtigt. Bei niedriger Magnesiumkonzentration (0,5 mM) wurden die Mineralisation erhöht, das Wachstum hingegen gehemmt.
    Notes: Abstract A method for studying the growth of fetal rat long bones in a chemically defined medium in organ culture is described. Cartilage ends and bone shafts were analyzed separately for growth and mineralization by measuring the collagen, calcium, and phosphate content, dry weight, and incorporation of labeled proline into hydroxyproline. Growth and mineralization of the bone shaft were slower in a chemically defined medium thanin vivo. Growth could be enhanced by supplementation of the medium with non-essential amino acids, albumin or serum. Cartilage ends showed a greater increase in weight and collagen content than the shafts, and medium supplements had less effect on their growth. Bone shaft growth and mineralization were enhanced by increasing medium phosphate concentration over a range of 1.5 to 4.5 mM whether or not the medium was supplemented with serum or albumin. At a low medium calcium concentration (0.5 mM) bone shaft growth and mineralization were impaired. At a low magnesium concentration (0.5 mM) mineralization was enhanced, but growth was impaired.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 5
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 14 (1974), S. 49-58 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Glycosaminoglycans ; Intracellular ; Chondrocytes ; Cartilage ; Embryonal ; Bone
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les glycosaminoglycanes acides de chondrocytes isolés, en suspension, sont étudiés. La matrice extracellulaire est isolée par traitement successif à la trypsine et à la collagénase d'os d'embryons de poulet, âges de 15 à 17 jours. Après digestion à la papaïne et élimination des acides nucléïques par traitement à la DNAse et à la RNAse, les glycosaminoglycanes sont précipités par le CPC et isolés sous la forme de leur sel sodique. Les analyses des propriétés de solubilité du CP glycosaminoglycane par le microfractionnement d'Antonopoulos et coll. (1964) révèlent la présence de glycosaminoglycanes intracellulaires de poids moléculaire et/ou de densité de charge nettement plus faibles que ceux de la matrice extracellulaire. Sur des électrophorèses de microzones, une petite partie des glycosaminoglycanes intracellulaires isolées présente une mobilité similaire à celle des solutions témoins de sulfate de chondroitine, alors que la portion la plus importante ne se déplace qu'à mi-distance de l'acide hyaluronique et montre une large trainée, indiquant une faible charge négative. Ce fait semble dû à une perte de l'influence de régulation des composants matriciels éliminées, sur la synthèse des glycosaminoglycanes et au rejet dans le milieu de glycosaminoglycanes initialement synthétisé. Pour la première fois, une faible quantité d'acide hyaluronique intracellulaire est mise en évidence par une mobilité électrophorétique typique.
    Abstract: Zusammenfassung Saure Glykosaminoglycane von isolierten Chondrocyten in Suspension wurden untersucht, und die extracelluläre Matrix von 15–17 Tage alten Knochen von Kükenembryos wurde durch die aneinanderfolgende Behandlung mit Trypsin und Collagenase erhalten. Nach der Papain-Verdauung und Beseitigung der Nucleinsäuren mittels DNS- und RNSase-Behandlung wurden die Glykosaminoglycane mit CPC gefällt und als Natriumsalz isoliert. Untersuchungen der Löslichkeit der CP-Glykosaminoglycane mittels des Mikrofraktionierungsverfahrens von Antonopouloset al. (1964) zeigten intracelluläre Glykosaminoglycane mit meist niedrigerem Molekulargewicht und/oder niedrigerer Ladungsdichte als diejenigen der extracellulären Matrix. In der Mikro-Zonen-Elektrophorese zeigte nur ein kleiner Teil der isolierten intracellulären Glykosaminoglycane eine Mobilität, die dem Standard des Chondroitinsulfats entsprach. Der größte Teil legte nur die halbe Distanz der Hyaluronsäure zurück und zeigte breites “Tailing”, was auf eine niedrigere negative Ladung hindeutet. Die Ursache dafür wurde interpretiert als Verlust eines regulierenden Einflusses der entfernten Matrixkomponenten auf die Glykosaminoglycan-Synthese und als Abgabe ursprünglich synthetisierter Glykosaminoglycane in das Medium. Es wurde erstmals, anhand der typischen elektrophoretischen Beweglichkeit, eine kleine Menge von intracellulärer Hyaluronsäure nachgewiesen.
    Notes: Abstract Acid glycosaminoglycans were studied from isolated chondrocytes in suspension and the extracellular matrix obtained by sequential trypsin and collagenase treatment of 15- to 17-day-old embryonic chick bone. After papain digestion and removal of the nucleic acids by treatment with DNAse and RNAse, the glycosaminoglycans were precipitated by CPC and isolated as their sodium salt. Analyses of the CP-glycosaminoglycan solubility properties with the microfractionation procedure of Antonopouloset al. (1964) showed intracellular glycosaminoglycans of predominantly lower molecular weight and/or charge density than those of extracellular matrix. On micro-zone electrophoresis, only a minor part of the isolated intracellular glycosaminoglycans showed a mobility similar to that of the chondroitin sulphate standards while the major part moved only half the distance of hyaluronic acid and showed broad tailing, indicating a low negative charge. This was considered to be due to loss of a regulatory influence of the removed matrix components upon glycosaminoglycan synthesis and to release of originally synthesized glycosaminoglycans into the medium. For the first time, a small amount of intracellular hyaluronic acid was shown by typical electrophoretic mobility.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 6
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Mineralization ; Histochemistry ; Matrix vesicles
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les expériences portent sur la minéralisation de la plaque épiphysaire tibiale du rat de souche Long-Evans, étudiée après traitement à la cortisone, propylthiouracile ou après jeûn prolongé. Dans des conditions normales, le calcium et le phosphate augmentent au niveau de la matrice extracellulaire, alors que les mucopolysaccharides sulfonés diminuent. Par contre, les vésicules de la matrice au niveau desquels se forment les cristaux d'hydroxyapatite, augmentent. Dans les rats ayant subi un traitement à la propylthiouracile, les cristaux d'hydroxyapatite sont très apparents. Ceci est du à une augmentation du dépôt en calcium, et à une diminution des granules des mitochondries qui contiennent probablement du calcium et du phosphate. En outre, une augmentation du nombre des vésicules de la matrice est visible ainsi qu'une décroissance de la quantité des mucopolysaccharides sulfonés. Dans les rats traités à la cortisone, les cristaux d'hydroxyapatite sont présents, mais dans une quantité moindre que dans les rats ayant subi l'effet du propylthiouracile. Le dépôt en calcium est légèrement réduit; les granules des mitochondries sont plus nombreuses que dans les groupes précédents, le nombre des vesicules de la matrice est plus faible, et les mucopolysaccharides sulfonés sont plus apparents que dans les rats traités à la propylthiouracile. Dans les rats ayant subi l'effet du jeûn, les cristaux d'hydroxyapatite sont fortement réduits ou entièrement absents. Ceci est du à une réduction de dépôt du calcium, une augmentation du nombre des granules des mitochondries (ce qui semble indiquer que les phénomènes de transport vers la matrice extracellulaire sont ralentis), alors que les vésicules de la matrice sont présentes dans des quantités réduites. Les mucopolysaccharides sont plus apparents que dans les animaux traités à la cortisone ou à la propylthiouracile.
    Abstract: Zusammenfassung Die Untersuchung beruht auf einem Vergleich der Mineralisation in der hypertrophischen Zone in der Epiphysealplatte von Long Evans Ratten die mit Kortison, Propylthiourazil oder einfachem Fasten behandelt wurden. Unter Normalbedingungen lassen sich in der extrazellulären Matrix der Calcifikationszone die folgenden Veränderungen beobachten: der Gehalt an Calcium und Phosphat nimmt zu, derjenige an Mukopolysacchariden nimmt ab, während die Matrixvesiclen, in denen sich die Bildung des Hydroxylapatits vollzieht, zunehmen. In Ratten die mit Propylthiourazil behandelt wurden, treten die Hydroxylapatitskristalle besonders hervor. Dies hängt mit einer Zunahme der Calciumablagerung zusamen sowie einer Abnahme der Mitochondriengranulation (in denen vermutlich Calcium und Phosphat enthalten sind). Ferner hängt damit zusammen eine numerische Zunahme der Matrixvesiceln sowie ein starke Abnahme des Gehalts an sulfonierten Mucopolysacchariden. In den mit Kortison behandelten Ratten sind Hydroxylapatikristalle nachweisbar, wenn auch weniger zahlreich als in den mit Propylthiourazil behandelten. Dem entspricht auch eine leicht reduzierte Calciumablagerung sowie eine Mitochondrialgranulation die derjenigen der anderen Ratten überlegen ist; Matrixvesiceln sind weniger zahlreich und sulfonierte Mucopolysaccharide sind deutlicher nachweisbar als in den Tieren, die Propylthiourazil erhielten. Fasten führt zu einem auffallenden Verlust an Hydroxylapatitkristallen. Diese können sogar nicht mehr zu erkennen sein. Dies hängt mit verminderter Calciumablagerung zusammen sowie einer Zunahme der Mitochondrialgranulation. Dies ist vermutlich Ausdruck einer Transportverzögerung zur extrazellularen Matrix. Nach Fasten ist auch die Anzahl der Matrixvesiceln auffallend herabgesetzt, und der Gehalt an sulfonierten Mucopolysacchariden ist größer als in den mit Kortison bzw. Propylthiourazil behandelten Tieren.
    Notes: Abstract Comparison of mineralization in the hypertrophic zone of the tibial epiphyseal plate in immature rats was carried out after treatment with cortisone, propylthiouracil, or after fasting. Under normal conditions, in the extracellular matrix at the calcification front, calcium and phosphate increased, sulfated mucopolysaccharides decreased, and matrix vesicles, which serve as the locus for the formation of hydroxyapatite crystals, increased. In propylthiouracil-treated rats, hydroxyapatite crystals were prominent, related to an increase in calcium deposition, a decrease of mitochondrial granules (thought to contain calcium and phosphate), an increase in the number of matrix vesicles, and to a marked decrease in the amount of sulfated mucopolysaccharide. In cortisone-treated rats, hydroxyapatite crystals were present but they were not as numerous as in the propylthiouracil-treated rats. Correspondingly, calcium deposition was slightly reduced, mitochondrial granules were more numerous than in the previous groups of rats, matrix vesicles were less numerous, and sulfated mucopolysaccharide were more prominent than in the propylthiouracil-treated rats. In fasted rats, hydroxyapatite crystals were markedly reduced or absent, and related to a decrease in calcium deposition, an increase in the number of mitochondrial granules (suggesting a delay in transport to the extracellular matrix). Matrix vesicles were markedly reduced in number, and sulfated mucopolysaccharide much more prominent than in either the cortisone or the propylthiouracil-treated rats.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 7
    Electronic Resource
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    Springer
    Calcified tissue international 15 (1974), S. 253-267 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Ageing ; Cartilage ; 35S-incorpotation ; Glycosaminoglycans
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé L'incorporationin vitro de35S-sulfate en fractions chondroitine sulfate, étudiée quantitativement et après séparation, a été déterminée dans diverses couches de cartilage bovin en fonction de l'âge. Après incubationin vitro dans une solution de Tyrode avec du35S-sulfate, les specimens sont lavés pendant 12 heures dans une solution saturée de sulfate de sodium. Aucune perte en chondroitine sulfate n'est observée dans le cartilage articulaire jeune et adolescent après incubation et lavage: les protéoglycanes semblent fermement liés. Au contraire, des pertes importantes de chondroitine sulfate sont observées dans le cartilage épiphysaire. Chez la vache, on ne constate pas de perte de condroitine sulfate dans les couches superficielles, mais des pertes augmentées de chondroitine et kératane sulfates sont notées dans les couches moyenne et profonde. Quel que soit l'âge, la couche de surface articulaire présente des «activités spécifiques» élevées dans les diverses fractions de chondroitine sulfate et une incorporation de35S-sulfate dans le chondroitine sulfate de poids moléculaire et/ou de densité de charge élevès, suggérant une activité métabolique augmentée. Dans la matrice de cette couche, le chondroitine sulfate est surtout constitué de fractions à poids moléculaire faible et peu chargées Dans les autres couches, l'incorporation du35S s'effectue en fonction de la distribution du chondroitine sulfate. Ce fait suggère que la sulfatation s'effectue à l'intérieur des cellules. Les résultats semblent indiquer un taux de synthèse identique pour différents types de chondroitine sulfate. L'incorporation augmentée, du35S-sulfate en chondroitine sulfate à des âges plus avancés indiquent une synthèse plus rapide. probablement secondaire à une dégradation augmentée.
    Abstract: Zusammenfassung Der in-vitro-Einbau von35S-Sulfat in Chondroitinsulfat-Fraktionen wurde in verschiedenen Schichten von bovinem Gelenkknorpel in Zusammenhang mit dem Alter quantitativ bestimmt. Nach in-vitro-Inkubation in Tyrodelösung mit35S-Sulfat wurden die Proben 12 Std lang in gesättigter Natriumsulfatlösung gewaschen. In jungem und jugendlichem Gelenkknorpel erfolgte nach der Inkubation und dem Waschen kein Verlust von Chondroitinsulfat. Die Proteoglycane scheinen fest gebunden zu sein. Hingegen wurde beim Epiphysenknorpel ein großer Verlust von Chondroitinsulfat festgestellt. Bei der Kuh verloren die Oberflächenschichten kein Chondroitinsulfat, aber bei den mittleren und tiefen Schichten erfolgte ein zunehmender Verlust von Chondroitin- und Keratansulfat. Bei allen Altersstufen zeigte die 40 μ dicke Oberflächenschicht des Gelenkknorpels hohe „spezifische Aktivitäten” in den verschiedenen Chondroitinsulfat-Fraktionen und Einbau von35S-Sulfat in Chondroitinsulfat von vorwiegend hohem Molekulargewicht und/oder hoher Ladungsdichte, was einen erhöhten Umsatz vermuten läßt. In der Matrix dieser Schicht bestand das Chondroitinsulfat vorwiegend aus Fraktionen mit niederem Molekulargewicht und niederer Ladung. In den anderen Schichten entsprach das Bild des35S-Einbaus weitgehend der Verteilung des Chondroitinsulfats. Dies deutet darauf hin, daß die Sulfatierung innerhalb der Zellen vollzogen wird. Weiter ließen die Befunde ähnliche Umsatzraten für die verschiedenen Chondroitinsulfate vermuten. Der erhöhte Einbau von35S-Sulfat ins Chondroitinsulfat bei höherem Alter deutet auf eine erhöhte Synthese, wahrscheinlich sekundär zum erhöhten Abbau.
    Notes: Abstract The incorporationin vitro of35S-sulphate into chondroitin sulphate fractions, quantitatively assessed and separated, was studied in different layers of bovine articular cartilage in relation to age. After incubationin vitro in Tyrode solution with35S-sulphate the specimens were washed for 12 hours in saturated sodium sulphate solution. No loss of chondroitin sulphate occurred in the young and adolescent articular cartilage after the incubation and washing procedures. Thus, the proteoglycans appear to be firmly bound within this cartilage In contrast, large losses of chondroitin sulphate were found from the epiphyseal cartilage. In the cow, no chondroitin sulphate was lost from the superficial layers but increasing losses of both chondroitinand keratansulphate occurred from the middle to the deep layers. In all ages, the articular surface layer 40 μ in thickness showed high “specific activities” in the different chondroitin sulphate fractions and incorporation of35S-sulphate into chondroitin sulphate of predominantly high molecular weight and/or charge density suggesting an increased turnover rate of these fractions. In the matrix of this layer, the chondroitin sulphate consisted of predominantly low molecular weight/low charged fractions. In the other layers, a pattern of35S incorporation was found largely reflecting the actual chondroitin sulphate distribution pattern. This suggests that sulphation is completeted intracellularly. Further, the data suggested similar turnover rates for the different chondroitin sulphates. Increased incorporation of35S-sulphate into chondroitin sulphate at higher ages indicated increased rate of synthesis, probably secondary to increased degradation.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 8
    Electronic Resource
    Electronic Resource
    Springer
    Calcified tissue international 15 (1974), S. 237-251 
    ISSN: 1432-0827
    Keywords: Cartilage ; Glycosaminoglycans ; Concentration ; Distribution ; Age
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine , Physics
    Description / Table of Contents: Résumé Les glycosaminoglycanes de diverses couches de cartilage articulaire bovin de veaux, génisses et vaches ont été étudiés quantitativement et qualitativement en utilisant une technique de microfractionnement, suivie d'electrophorèse en microzone des diverses fractions. Le contenu en eau, calcium et hydroxyproline a également été déterminé. Le chondroitine-4-sulfate constitue le glycosaminoglycane principal dans toutes les couches chez le veau et la génisse, alors que le chondroitine-6-sulfate prédomine chez la vache. Des fractions correspondantes des microcolonnes présentent une mobilité électrophorétique variable, aussi bien en fonction de la profondeur à partir de la surface articulaire qu'avec l'âge. En général, une concentration augmentée de glycosaminoglycanes est observée à tous les âges en s'éloignant de la surface articulaire. Chez les veaux et les génisses, le chondroitine sulfate est responsable de cette augmentation, alors que chez les vaches, ce sont le kératane sulfate et, vraisemblablement, les glycoprotéines qui sont les constituants majeurs, responsables des concentrations plus élevées en hexosamine observées dans les couches les plus profondes. A tout âge, le chondroitine sulfate montre une augmentation relative des fractions à poids moléculaire/densité de charge augmentés en fonction de la plus grande profondeur. Chez les veaux et les génisses, les fractions isolées présentent une homogénéité electrophorétique, alors que chez les vaches un chondroitine sulfate supplémentaire à faible mobilité est mis en évidence. Ce chondroitine sulfate de la surface articulaire est fort hétérogène en fonction de l'âge. Le rapport des fractions combinées kératane sulfate et glycoprotéines par rapport au chondroitine sulfate augmente notablement avec l'âge.
    Abstract: Zusammenfassung Die Glycosaminoglycane von verschiedenen Schichten aus bovinem Gelenkknorpel von Kälbern, jungen und älteren Kühen wurden quantitativ und qualitativ untersucht, und zwar mittels CPC-Mikrofraktionierung und darauffolgender Mikrozonen-Elektrophorese bei verschiedenen Fraktionen; auch der Gehalt an Wasser, Calcium und Hydroxyprolin wurde bestimmt. Chondroitin-4-Sulfat kam in allen Schichten des Knorpels von Kälbern und jungen Kühen am häufigsten vor, während Chondroitin-6-Sulfat bei älteren Kühen vorherrschte. Entsprechende Fraktionen von den Mikrosäulen zeigten unterschiedliche elektrophoretische Eigenschaften, je nach der Schichttiefe von der Gelenksoberfläche und nach dem Alter. Im allgemeinen wurde bei zunehmendem Abstand von der Gelenksoberfläche eine zunehmende Konzentration an Glycosaminoglycanen festgestellt. Bei Kälbern und jungen Kühen wurde diese Zunahme durch Chondroitinsulfat verursacht, während bei älteren Kühen Keratansulfat und möglicherweise Glycoproteine die Hauptkomponenten der erhöhten Hexosamin-Konzentrationen waren, welche bei zunehmender Schichttiefe festgestellt wurden. In allen drei Gruppen zeigte Chondroitinsulfat bei zunehmender Schichttiefe eine relative Zunahme von Fraktionen mit höherem Molekulargewicht und höherer Ladungsdichte. Bei Kälbern und jungen Kühen zeigten die einzelnen Fraktionen elektrophoretische Homogenität, während bei älteren Kühen ein zusätzliches Chondroitinsulfat mit äußerst langsamer Mobilität gefunden wurde. Das Chondroitinsulfat der Gelenksoberfläche zeigte bei allen Altersgruppen eine beträchtliche Heterogenität. Das Verhältnis der kombinierten Keratansulfat- und Glycoproteinfraktionen zum Chondroitinsulfat nahm mit zunehmendem Alter beträchtlich zu.
    Notes: Abstract The glycosaminoglycans in different layers of bovine articular cartilage from calves, heifers and cows were studied quantitatively and qualitatively using CPC microfractionation procedure and by subsequent microzone electrophoresis on different fractions; water, calcium and hydroxyproline were also estimated. Chondroitin-4-sulphate was the main glycosaminoglycan in all layers in calves and heifers while chondroitin-6-sulphate predominated in cows. Corresponding fractions from the microcolumns showed different electrophoretic mobility varying with the depth from the articular surface and with age. In general, increased concentration of glycosaminoglycans was found in all ages with increasing distance from the articular surface. In calves and heifers, chondroitin sulphate was responsible for this increase while in cows, keratan sulphate, and possibly glycoproteins, were the major components of the increased hexosamine concentrations found with increasing depth. In all ages chondroitin sulphate showed a relative increase of fractions with higher molecular weights/charge density with increasing depth. In the calves and heifers, the individual fractions showed electrophoretical homogeneity while in cows an additional chondroitin sulphate showing an extremely slow mobility was found. The chondroitin sulphate in the articular surface layer showed considerable heterogeneity in all ages. The ratio of the combined keratan sulphate and glycoprotein fractions to chondroitin sulphate increased significantly with increasing age.
    Type of Medium: Electronic Resource
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  • 9
    Electronic Resource
    Electronic Resource
    Springer
    Cell & tissue research 147 (1974), S. 505-527 
    ISSN: 1432-0878
    Keywords: Cartilage ; Ageing ; Chondrocyte and matrix ; Light microscopy ; Histochemistry ; Electron microscopy
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine
    Notes: Summary Histological, histochemical, and ultrastructural investigations have been carried out on ageing costal and tracheal cartilage of rats. The following age groups of animals have been studied: 1, 7, 14, 20, 30, 45, 75 days, 6 months, and 2 years. Ageing induces cellular changes which are represented by a reduction in the number of chondrocytes, a progressive increase in glycogen deposition, and processes of degeneration, the most frequent of which is the accumulation of lipidic material within large cytoplasmic vacuoles. Changes in the intercellular matrix become evident after 20 days in costal cartilage and after 30 days in tracheal cartilage. Chondroitin sulphate decreases while keratan sulphate, whose presence is limited to the territorial matrix, increases. Glycoproteins increase slightly in young animals and then remain constant; they decrease in the subperichondrial areas in old animals. Ultrastructurally, the matrix of cartilage of young animals contains thin collagen fibrils, most of which have no periodic banding. Roundish electron dense granules are associated with these fibrils. Irregular filaments associated with small electron-dense circular bodies are present around chondrocytes as well as within cytoplasmic vacuoles. With increasing age, and coincident with the reduction of chondroitin sulphate, the thickness of collagen fibrils increases, their period becomes evident, and the associated matrix granules decrease in number and size. Areas containing these fibrils undergo calcification, which frequently starts within roundish bodies of cellular origin. Collagen fibrils with a period of 640 Å but a highly variable thickness are often present in cartilage of adult and old rats. These fibrils seem to be due to an abnormal synthetic activity of chondrocytes.
    Type of Medium: Electronic Resource
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